使用ImageXpressPico个人型高内涵成像分析系统进行细胞-生物通.PDF

使用 ImageXpressPico 个人型高内涵成像分析系统 进行细胞迁移分析 R. McMillan12, J.A.Hesley1, J.McMillan1, M.Thomas3 1 MolecularDevicesLLC.,SanJose,CA, 2 UniversityofCaliforniaLosAngeles, 3 PlatypusTechnologiesInc.,Madison,WI 摘要 织是非常重要的，组织的再生也是非常重 我们假设化疗药物会抑制细胞迁移，而高 细胞迁移，即细胞的重新定位，与伤口愈 要的，这是由 M2 巨噬细胞的细胞因子分泌 内涵系统可以成功地成像和分析细胞运 合、免疫学、胚胎发育和不规则细胞事件 所促进的 (Shiraishi et al., 2016; Julier et 动。在这里，我们展示了松胞菌素 D、秋 ( 如癌症转移 ) 有关。细胞迁移测定法用于 al., 2017)。然而，在包括类风湿关节炎在 水仙碱和诺科达唑在检测浓度下显著抑制 测量细胞在受控环境中的运动，经常手工 内的许多自身免疫性疾病中，免疫细胞的 细胞迁移，并且可以使用高内涵系统进行 制备和分析。在这个项目中，我们利用了 迁移和积累会产生灾难性的影响 (Nevius 细胞迁移成像和分析。 一种适应性细胞迁移实验，在微孔板的每 et al., 2016)。此外，在受癌症影响的个体 孔中加入了一种圆形的、可溶解的生物相 的肿瘤微环境中，细胞运动被上调，从而 容性凝胶，以确定 Pico 个人型高内涵成像 加剧了癌症的进展 (Barret et al., 2017)。 分析系统是否能够有效地成像和分析细胞 因此，在研究疾病的发病机制和开发潜在 材料 迁移。我们研究了两种不同的癌细胞系的 的治疗方法和候选药物时，细胞迁移和这 • 检测试剂盒细胞 迁移：HT1080 ( 来自人类纤维肉瘤细胞 ) 种运动的测量是一个有趣的领域。 HT1080 纤维肉瘤细胞株 和 U2 OS ( 来自人类骨肉瘤细胞 )，这两种 (ATCC P/N CCL-121) 细胞迁移试验用于测量细胞在受控环境下 癌细胞系被以优化的密度在包含圆形生物 的运动能力。通常，“划痕”分析用于此 U2 OS骨瘤细胞系 相容凝胶的 384 孔板中沉积，生成融合单 目的。当培养细胞在微孔板中聚合后，通 (Millipore Sigma P/N CLL1037) 层。在不同浓度下评价了 5 种抑制细胞迁 常用吸管尖在每孔中制造一道薄薄的划痕 移的化疗药物，并测量了 45 小时以上对细 SiR - Actin试剂盒 或伤口。随着时间的推移，细胞会迁移到 胞活力的影响。我们收集了一系列的延时 (Cytoskeleton Inc. P/N CY-SC001) 受伤区域。虽然这种方法是可以承受的， 图像，以便随着时间的推移可以测量无细 但是在孔中，伤口的大小和位置往往不相 胞嘧啶 β-D- 阿拉伯糖苷盐酸盐 (Ara C) 胞区域的闭合情况。利用图像分析软件对 同，手工制备划痕既费力又费时，而且不 (Sigma Aldrich P/N C1768) 细胞所覆盖的井面积进行量化。比较了透 能采用 384 孔板模式进行筛选。为了提高 射光图像和荧光图像的分析结果。结果表 Oris™ Pro 细胞.迁移 (Platyp