含AZT的硫酸化多糖的合成-有机化学专业论文.docxVIP

一、 一、 绪论 多糖是来自于高等植物、动物细胞膜、微生物的细胞壁中的天然大分子物质，是 所有生命有机体的重要组成成分和维持生命所必需的结构材料ll】，人们对糖的认识首 先是把它看作食物中的能量来源【21。近几十年来，由于相关研究包括膜的化学功能， 免疫物质的研究以及对新药物资源的寻找等，人们发现糖类在生物体中不仅是作为能 量资源或结构材料，更重要的是它参与了生命科学中细胞的各种活动，具有多种多样 的生物学功能。因此糖的研究逐步活跃起来，其中，一些分子量在几千以上，具有很 强生物活性的活性多糖的研究受到日益重视。多糖来源广泛，大多数高等植物、微生 物(细菌和真菌)、动物体内和海藻地衣中均含有丰富的多糖，到目前为止，已有300 多种多糖类化合物从天然产物中被分离提取出来【31，这些活性多糖的生理活性、化学 结构以及构效关系，成为多糖研究的前沿阵地，取得了很大的进展【41。 由天然产物中提取到的有生物活性的多糖，往往组分很复杂，分子量变化大，且 有时很难得到足够量以进行生物和化学试验。而用化学合成法得到的寡糖和多糖，结 构清楚、组分单一，是研究糖结构与功能关系的理想试样。因此用有机合成的方法制 备有特定连接方式的寡糖和多糖，对糖的化学与生物学研究都是至关重要的。而研究 新的、更有效的合成寡糖、多糖的方法是生物化学界、医学界、乃至与糖化学有关的 产业界向有机化学家提出的具有挑战性的任务。 1．天然多糖 1．1天然多藉的提取 1．天然多糖的提取 多糖的提取研究通常分提取、纯化、分级三步进行。多糖的分离纯化是多糖研究 多糖的提取研究通常分提取、纯化、分级三步进行。多糖的分离纯化是多糖研究 的关键，其成功与否、效果的好坏都会直接影响后续研究的可性与可信度。多糖提取 的常用方法是溶剂抽提和乙醇沉淀。不同的多糖提取所用溶剂不同，大多数多糖可采 用一定温度的水或稀碱溶液提取。有些原料提取多糖前，还需要脱脂或脱色处理。分 离沉淀后得到的多糖提取物中，常会有无机盐、醇不溶低分子有机物，大分子蛋白质 等杂质，所以分级前进行必须纯化处理。脱除非多糖组分，一般是先脱除蛋白质后再 去除小分子杂质。多糖脱蛋白常用方法有Sevag法、三氯乙酸法、三氯三氟乙烷法、 酶法；而除去小分子物质则常用DEAE．纤维素层析、Sephadex凝胶过滤、季铵盐沉淀 盐析、亲和层析、超滤和电泳等方法。在获得单一多糖组分后，对其纯度进行鉴定。 需要说明的是，多糖的纯度不能用通常化合物的纯度标准来衡量，因为即便是多糖纯 品，其微观也并不均一，仅代表相似链长的多糖分子的平均分布，通常所谓的多糖纯 品实际上也只是一定相对分子质量范围的多糖的均一组分。目前常用于多糖纯度鉴定 的方法有凝胶过滤法、高压电泳法超离心法、旋光测定法、毛细管电泳法等。其中应 最多的凝胶层析法。 1．2多糖结构的测定方法 多糖的结构测定是比较困难，但解剖多糖的低级和空间结构，对于明确多糖的 生物学功能具有重要的意义。 阐明多糖的一级结构已建立化学方法、物理学方法、 生物学方法等许多分析方法，随着现代分析技术的出现与发展，新技术不断引入到糖 链的结构分析中【5】。 1．化学方法 化学方法是测定多糖一级结构的经典方法。 (1)水解法：将糖链通过完全水解分解为各个单糖，是分析多糖链组成成分的主 要手段，水解法包括完全酸水解、部分酸水解、乙酰解和甲醇解等。I)完全酸水解： 将多糖以强酸(硫酸、盐酸)等试剂作用，在一定温度下(80—100℃)进行完全酸水解 “．Ioh)。水解的难易程度与组成多糖的单糖性质、单糖环的形状和糖苷键的构型有关， ～般呋喃糖苷键较吡喃型易水解，n型较B型易水解，含有糖醛酸或氨基糖的多不易 水解。水解试剂的不同会影响水解条件。水解之后的多糖经中和、过滤，可采用纸层 析(Pc)、薄层层析(TLC)、气相色谱法(OC)、液相色谱法(HPLc)[6】和离子色谱 法‘71进行分析。多糖水解产物的GC分析，通常是先经衍生化处理成易挥发组成分， 常采用的衍生化方法是硅烷基化和乙酰化处理。高效液相色谱法则克服了GC需衍生 常采用的衍生化方法是硅烷基化和乙酰化处理。高效液相色谱法则克服了GC需衍生 化的缺陷，它可直接进样测定。同样离子色谱法不需要衍生处理，而且检测灵敏度甚 至比HPLC法更高。离子色谱法的原理是将样品经强碱性物质离子化后，通过离子色 谱柱经脉冲安培检测器检测。II)部分酸水解：利用多糖链中部分糖苷键如呋喃型糖苷 键，位于链末端的糖苷键和支链上的糖苷键易水解脱落，而构成糖链的主链重复结构的 部分和糖醛酸等对酸水解则相对稳定的特点，对多糖常采用部分酸水解法处理．多糖经 部分酸水解后，经醇析、离心，将上清液和沉淀分别进行分析，多糖部分酸水解之后的 醇析产物往往是多糖的主链重复性结构片段，糖醛酸链片段，