固相萃取-离子色谱法测定生物样品中氟乙酸钠含量的研究-有机化学专业论文.docx

固相萃取一离子色谱法测定生物样品中氟乙酸钠含量的研究 固相萃取一离子色谱法测定生物样品中 氟乙酸钠含量的研究 作 者：杨萍 指导老师：邓芹英教授 专 业：有机化学 摘要 近年来，鼠药中毒已经成为一个严重的社会问题和环境问题，氟乙酰胺是鼠 药中毒的主要部分之一。氟乙酰胺剧毒，进入生物体内容易转化为氟乙酸盐及其 它物质。受害生物体内氟乙酰胺(氟乙酸钠)含量极微，加上生物检材成分复杂， 要经过复杂的前处理过程才‘能将其有效的提取，分离和富集，而且氟乙酰胺(氟 乙酸钠)分子小、极性大、难挥发、没有明显的紫外吸收，用常规的气相色谱(GC) 和液相色谱(HPLC)不能直接检测，必需通过衍生化，在分子中引进能被高灵 敏检测的基团。以适应于NPD和ECD等的GC检测，或紫外和荧光的HPLC检 测：衍生化反应又可能带来新的杂质，使色谱图复杂化，干扰增大，氟乙酰胺类 毒药是目前检验难度最大的毒物之一。目前对氟乙酰胺(氟乙酸钠)尚没有～。种 统一准确的检测方法，因此建立一种简单、易行、灵敏、快速的定性定量测定方 法，解决日益增多的氟乙酰胺类鼠药中毒案件的侦破，查明中毒原因，寻找毒源， 有效的打击犯罪，保障广大人民群众的生命财产具有非常重要的意义。 本论文研究了用水提取，固相萃取法纯化、富集生物样品中氟乙酸钠的样品 前处理方法，用离子色谱作为监控固相萃取回收率的手段。采用C18固相萃取柱 和SAX阴离子交换柱两种不同的原理的固相萃取法，C18固相萃取柱不保留氟乙 酸钠，用来除去检材中大部分有机干扰成分，C，8固相萃取柱萃取氟乙酸钠同收 率达99～108％，血样中的回收率在85％以上；SAX阴离子交换柱则保留氟乙酸 根离r，用小体积的洗脱液沈脱而使样品富集，能够同时净化和富集氟乙酸钠。 根离r，用小体积的洗脱液沈脱而使样品富集，能够同时净化和富集氟乙酸钠。 通过对固相萃取条件的优化，取得良好的萃取效果，用1．5mL的O．5mol／L的盐 酸做洗脱液t fui收率为9i％以上，富集倍数可达25倍，最低能够检测0．001mg／L 的氟乙酸钠溶液，血样中最低能够检测到O．5mg／L，全程回收率在80％以上 本论文建立了用离子色谱测定生物样品中氟乙酸钠含量的方法。在O．2mL 血液样品中加入lmL纯水，然后用乙腈沉淀蛋白质，待蛋白质沉降后取上层清 液经O．45,um过滤头过滤，滤液注进离子色谱仪进行氟乙酸钠的定性和定量分析。 用Dionex600离子色谱仪，配合电导检测器，Dionex Ion Pac ASl 1明离子交换 色谱柱(结合相应的AGll保护柱)，以2．0mmol／L的Na／B407溶液为淋洗液， 25,uL定量进样环，测定生物样品中的氟乙酸钠，在0．10～10．OⅣg／mL浓度范围 内峰面积和质量浓度呈良好的线性范围(r2=0．9978)，方法的检测限为0．05ug／mL。 实际测定了血液样品的氟乙酸钠，平均全程回收率在85％以L。该法也可用于食 物和生物检材中氟乙酸钠的测定。 本研究还对毛细管电泳测定氟乙酸钠的方法进行了初步研究。 关键词： 氟乙酸钠； 固相萃取：离子色谱；毛细管电泳 Study Study on Determination of Sodium Fluoroacetate in Biological Sample by Solid Phase Extraction—Ion Chromatography Name：YangPing Supervisor：Professor Deng Qinying Major：Organic Chemistry Abstraet The poisoning of raticide has become a serious social and environmental issue these days．Fluoroacetamide is the main part of poisoning of mticide．Which is acute poisonous and easy to translate into sodium fluoroacetate and other matters when entering the organism．Because the content of fluoroacetamide in the toxic organism is very little and the composing of organism is complicated，the pretreatment is necessary for the effective extraction，separation and enrichment．Furthermore， fluoroac