华南理工微生物工程工艺原理第十一章章节+工业发酵染菌的防治1.pptVIP

1，国外一抗生素发酵染菌原因的分析 染菌原因 百分率% 染菌原因 百分率% 种子带菌 9.64 蛇管穿孔 5.89 接种时罐压跌零 0.19 接种管穿孔 0.39 培养基灭菌不透 0.79 阀门泄漏 1.45 空气系统带菌 19.96 罐盖漏 1.54 搅拌轴密封泄漏 2.09 其他设备漏 10.13 泡沫冒顶 0.48 操作问题 10.15 夹套穿孔 12.36 原因不明 24.91 2，国内一制药厂发酵染菌原因的分析 染菌原因 百分率，% 外界带入杂菌（取样、补料带入） 8.20 设备穿孔 7.60 空气系统带菌 26.00 停电罐压跌零 1.60 接种 11.00 蒸汽压力不够或蒸汽量不足 0.60 管理问题 7.09 操作违反规程 1.60 种子带菌 0.60 原因不明 35.00 3，从染菌的规模来分析染菌原因 大批发酵罐染菌 ：空气系统 部分发酵罐(或罐组)染菌：前期可能是种子带杂菌，或灭菌不彻底，中后期则可能是中间补料系统或油管路系统发生问题所造成的 个别发酵罐连续染菌：设备问题(如阀门的渗漏或罐体腐蚀磨损)，设备的腐蚀磨损所引起的染菌会出现每批发酵的染菌时间向前推移的现象 个别发酵罐偶然染菌：原因比较复杂，因为各种染菌途径都可能引起。 4，从染菌的时间来分析 发酵早期染菌：种子带菌、培养基和设备灭菌不彻底、设备或管道有死角 中、后期染菌：中间补料、设备渗漏、操作不合理 5，从染菌的类型来分析 耐热性芽抱杆菌：死角或灭菌不彻底 球菌、酵母：可能是从蒸汽的冷凝水或空气中带来的 浅绿色菌落(革兰氏阴性杆菌) ：发酵罐的冷却管或夹套渗漏 霉菌：灭菌不彻底或无菌操作不严格 第二节 发酵染菌的防止 一、种子带菌的原因及防止 1，带菌的原因 无菌室的无菌条件不符合要求 培养基灭菌不彻底 操作不当 2，种子带菌的防止 种子带杂菌是发酵前期染菌的原因之一。在每次接种后应留取少量的种子悬浮液进行平板、肉汤培养，借以说明是否是种子中带杂菌。种子培养的设备和装置有无菌室、灭菌锅和摇瓶机等。 （1）无菌室 无菌室的基本要求： 无菌室面积不宜过大，一般约4—6米2高约2．6米。 为了减少外界空气的侵入，无菌室要有1—3个套间(缓冲过道) 无菌室内部的墙壁、天花板要涂白漆或采用磨光石子，要求无裂缝，墙角最好做成圆弧形 。 室内布置应尽量简单，最好能安装空气调节装置，通入无菌空气并调节室内的温湿度。 无菌室的每个套间一般都用紫外线灭菌。 化学灭菌药剂 用作喷洒或揩擦的(以揩擦为主) ： 75%酒精 0．25%新洁而灭(季胺盐) 0．6~1%漂白粉 0．5%石炭酸 0．5%过氧乙酸 1%煤酚皂(来苏尔) 0．5%高锰酸钾 300单位／毫升土霉素 50单位／毫升制霉菌素等 用作熏蒸的 ： 甲醛(每立方米空间约用10毫升)或硫磺(每立 方米空间约用2—3克)。 无菌室内无菌度的要求 把无菌培养皿平板打开盖子在无菌室内放置30分钟，根据一般工厂的经验，长出的菌落在3个以下为好。 （2）种子培养基灭菌的注意事项 灭菌操作时需要注意排气管是否畅通 固体培养基可采用两次灭菌的方法 通入蒸汽后使瓶内培养基温度达到121oC所需的时间与瓶内培养基的体积有关 （3）种子摇瓶培养的注意事项 保证摇瓶间的清洁卫生 摇瓶内液体装料不宜过多 瓶口包扎的纱布一般为八层以上 二、发酵设备、管件的渗漏与配置 设备和管件的渗漏一般是指设备和管件由于腐蚀、内应力或其他原因形成微小漏孔所发生的渗漏现象。这些漏孔很小，特别是不锈钢材料形成的漏孔更小，有时肉眼不能直接觉察，需要通过一定的试漏方法才能发现。 1，设备渗漏的原因 发酵液中腐蚀性物质对设备的腐蚀 磨蚀 发酵液中固体物料因搅拌桨的搅动与冷却管摩擦而引起管外壁磨损 冷却介质和加热时蒸汽的冲击，引起管内壁的磨损 设备加工不良 弯管时，弯头处管壁变薄 焊接不良 2，盘管渗漏的防止 放罐后要认真清洗发酵罐 控制冷却水质量，降低其中氯离子含量 对盘管定期检查、试漏，及时发现漏隙 试漏方法 气压试验 ：先在发酵罐内放满清水，用压缩空气通入管子，观察水面有无气泡产生以确定管子有否渗漏和渗漏的部位。气压法快速方便，但管子下部弯曲处积水不易排尽，有漏孔时不产生气泡就难以发现。 水压试验 ：用手动泵或试压齿轮泵将水逐渐压入冷却管，泵到一定压力时，观察管子有否渗漏现象 3，空气分布管渗漏的防止 4，罐体渗漏的防止 5，管件的渗漏 与发酵罐相连接的管路很多，有空气、蒸汽、水、物料、排气、排污等管路，管路多，相应的管件和阀门也多。管道的连接方式、按装方法以及选用的阀门形式对防止污染有很大的关系。所以，与发酵有关的