棘胸蛙热休克蛋白90相关基因的全长cDNA克隆与表达分析-养殖专业论文.docxVIP

棘胸蛙热休克蛋白90相关基因的全长eDNA克隆与表达分析⑧ 棘胸蛙热休克蛋白90相关基因的全长eDNA克隆与表达分析 ⑧ 论文作者：韭睑 独盼 指导教师： 论文评阅人1：徐宁迎 评阅人2：陈有亮 评阅人3： 答辩委员会主席：刘建新 委员1：邵庆均 委员2：舒妙安 委员3：徐海圣 委员4：刘广绪 答辩El期：2016．03．05 万方数据 Characterization Characterization and ：pression ofol thetlle HSPH 90 ly genes i‘n Quasipaa spmosa ‘一 Author’S signature： 一 bupervisor’s signature： External Reviewers： Examining Committee Chairperson： Examining Committee Members： Date of oral defence： 万方数据 独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或 撰写过的研究成果，也不包含为获得渔太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过 的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表 示谢意。 学位论文作者签名：张盼 签字日期： 伽f多年石月23日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解迎太堂有关保留、使用学位论文的规定，有权保留 并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权监 酞堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩 印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名： 导师签名： 签字日期：锄形年歹月刁日 签字日期：彳纫／否年舌月刁歹百 万方数据 浙江大学硕士学位论文致谢 浙江大学硕士学位论文 致谢 求学时光如白驹过隙，转眼间我两年半的研究生生活即将画上一个句号。两年半的时 光虽然短暂，却是我人生中的一笔宝贵财富，使我受益匪浅，获益良多! 本论文是在导师舒妙安副教授的悉心指导和关怀下完成的。从论文选题、样本采集、 数据处理、论文修改整个过程都凝聚了舒老师的大量心血。同时，舒老师渊博的专业知识、 严谨的治学态度、精益求精的工作作风、诲人不倦的高尚师德以及对事业孜孜不倦的追求 都深深地影响着我，使我受益终身。在我短暂而紧张的两年半学--3生涯中，导师在科研与 生活方面都给予了我精心的指导和无微不至的关怀。值此论文完成之际，谨向恩师致以崇 高的敬意和由衷的感谢! 要特别感谢董伟仁老师对我实验的悉心指导，给予了我很大的帮助；感谢徐宾朋师兄 在实验过程中帮助、辅导我解决遇到的困难；感谢隆琛，师弟顾文彬、周忠凯，师妹屠丹 丹、周忆莲在论文完成过程中提供了帮助和支持! 感谢13级特动硕士班的所有同学给我带来的美好回忆；感谢室友平日里给予我的关 心和支持；另外也要特别感谢我所有的好朋友，感谢你们出现在我的生命里，支持我，陪 伴我一起成长。因为有你们，我的学校生活充实而快乐! 最后，由衷地感谢各位论文评阅老师和答辩委员会的各位专家在百忙之中给予我的宝 贵建议和指导，向你们表示最诚挚的谢意和最美好的祝愿! 张盼 于杭州·浙江大学紫金港校区 2016年1月 万方数据 棘胸蛙热休克蛋白90相关基因的全长eDNA克隆与 棘胸蛙热休克蛋白90相关基因的全长eDNA克隆与 表达分析 摘要 热休克蛋白是生物体受到应激后产生的一类蛋白质，对维持内环境稳定和细胞生存具 有重要作用。棘胸蛙是我国重要的养殖蛙类，养殖过程中常受高温及病原菌等方面的胁迫， 造成养殖蛙类的死亡，严重影响了我国蛙类养殖产业的发展。本研究采用同源克隆策略及 RACE技术，克隆了棘胸蛙HSP90及GRP94基因的全长eDNA序列，利用实时荧光定量 方法研究了棘胸蛙在高温、嗜水气单胞菌以及poly(I：C)胁迫情况下，HSP90基因和GRP94 基因的不同组织表达情况，并对其结果进行分析与讨论。 本实验采用同源克隆策略和RACE技术，克隆出了棘胸蛙HSP90基因和GRP94基因 的全长eDNA序列：(1)其中棘胸蛙HSP90基因eDNA全长为2801 bp，开放阅读框(ORF) 序列长度为2172 bp，编码724个氨基酸，5’非编码区序列为65 bp，3’非编码区序列为 564 bp，GenBank登录号为(KT970674)。氨基酸序列分析发现，该序列有5个HSP90 蛋白家族标签氨基酸序列，且在序列C末