样本含量估算方法实验设计论文.docxVIP

　　本文以广东省科技计划项目课题－磷酸酰肌醇－３激酶ＰＩ３Ｋ对小鼠气道炎症影响的实验研究为案例，介绍公式法、ＰＡＳＳ软件Ｓｉｍｐｌｅ法和Ｓｔａｔａ软件计算法这３种样本含量估算方法的实际应用，并通过实验所得数据验证其检验效能，判断３种方法确定的样本含量是否合理有效，为医学工作者实验设计时估算样本含量提供一定实践经验借鉴。 　　１材料与方法１．１材料１．１．１材料Ｂａｌｂ／ｃ小鼠由广州医学院动物中心提供，４～６周龄，雄性，清洁级，体质量２０～２５ｇ，无卵清蛋白ＯＶＡ饮食。 　　致敏液由０．０８％ＯＶＡ０．１ｍＬ美国Ｓｉｇｍａ公司和等体积液态铝美国Ｐｉｅｒｃｅ公司混合。 　　ＬＹ２９４００２ＰＩ３Ｋ抑制剂美国Ｓｉｇｍａ公司提供。 　　１．１．２动物分组分组方法随机数字表法。 　　组别ＯＶＡ组、ＬＹ２９４００２组和对照组。 　　１．１．３实验方法ＯＶＡ组本组小鼠于第０、７、１４天腹腔注射致敏液０．２ｍＬ，第１５天将小鼠置于透明密闭容器中以１％ＯＶＡ溶液１０ｍＬ雾化吸入，每次２０ｍｉｎ，隔日一次，连续５周。 　　ＬＹ２９４００２组同期同时给予注射致敏液和吸入ＯＶＡ，第１３天开始经尾静脉给予ＬＹ２９４００２，用量为７．５ｍｇ／ｋｇ，连续３ｄ每天１次，第１５天于吸入ＯＶＡ前３０ｍｉｎ给药。 　　对照组同期同时给予相同体积生理盐水腹腔注射及雾化吸入。 　　观察指标支气管肺泡灌洗液ＢＡＬＦ中细胞分类计数、骨髓悬液和肺组织学检查。 　　通过实验检测ＬＹ２９４００２对ＯＶＡ致敏哮喘小鼠肺组织病理、ＢＡＬＦ和骨髓中细胞分类的影响，计数细胞总数和嗜酸性粒细胞Ｅｏｓ并进行统计学分析［３］。 　　１．１．４实验目的运用公式法、ＰＡＳＳ软件Ｓｉｍｐｌｅ法和Ｓｔａｔａ软件计算法求得本实验的样本含量，并通过实验所得数据验证其检验效能，判断３种方法确定的样本含量的有效性。 　　１．２方法１．２．１公式法介绍ｎ＝［Ｚα／２＋Ｚβ＊σ／δ］２，ｎ为所需要的样本含量，δ为总体差值，σ为总体标准差，Ｚα／２为标准正态分布的双侧临界值；Ｚβ为正态分布的单侧临界值。 　　１．２．２ＰＡＳＳ软件介绍ＰＡＳＳ是样本含量估计和效能分析中常用的一款优秀的统计分析软件［４］。 　　它界面良好、功能齐全，可以进行描述性统计、相关及回归分析、实验设计、生存及可靠性分析、统计图表绘制等操作，只需要输入相应的参数，即可实现对样本含量或检验效能的预测。 　　常用方法有Ｃｏｍ－ｐｏｕｎｄＳｙｍｍｅｔｒｙ法、ＡＲ法、Ｂａｎｄｅｄ法和Ｓｉｍｐｌｅ法。 　　本实验研究选用Ｓｉｍｐｌｅ法。 　　１．２．３Ｓｔａｔａ软件介绍Ｓｔａｔａ是一个功能强大的统计分析软件，它可以进行ｔ检验、参数估计、协方差分析、单因素和多因素的方差分析、方差齐性检验、缺项数据的处理、正态性检验等一般分析。 　　它采用具亲和力的窗口接口，操作灵活简便、学习方便，使用者可以通过Ｓｔａｔａ官方网站学习使用方法。 　　该软件用于样本含量和检验效能估计的主要命令是ｓａｍｐｓｉｓａｍｐｌｅｓｉｚｅａｎｄｐｏｗｅｒ，命令格式为．ｓａｍｐｓｉ＃１＃２［，一般选择项］［重复测量选择项］。 　　＃１表示处理前测量的均数，＃２表示处理后测量的均数。 　　一般选择项包括检验效能、检验水平、ｎ１与ｎ２样本量的比值、ｓｄ１／ｓｄ２ｓｄ为标准差、单侧／双侧检验、单样本缺省时为两样本比较。 　　常用方法有ｃｈａｎｇｅ法、ｐｏｓｔ法和ａｎｃｏｖａ法，本试验研究选用ａｎｃｏｖａ法。 　　２结果２．１参数设置Ⅰ类错误概率大小α越小，所需要的样本含量越大，通常情况下α取０．０５，可取单侧或双侧用统计学检验。 　　选择双侧检验的条件是研究结果高和低于效应指标的界限均有意义，所需样本量就大；选择单侧检验条件是研究结果仅高或低于效应指标的界限有意义，所需样本量就小。 　　Ⅱ类错误概率大小β越小，检验效能１－β越大，所需样本量也越大，一般要求检验效能不低于０．８０，一般只取单侧，本实验取β＝０．１。 　　ｎ１与ｎ２样本量的比值常用的为４∶１、２∶１、１∶１，考虑成本最低取１∶１。 　　总体标准差σ或总体率π，常根据预实验及前人的研究结果或统计理论进行估计，根据何胜东等［５］的研究结果和其他资料，取π＝０．７，σ＝７．８７。 　　容许误差δ是指研究者要求的或客观实际存在的样本统计量与总体参数间或样本统计量间的差值，本实验认为Ｅｏｓ百分比降低８０％以上为有效，取δ＝０．８σ。 　　２．２计算结果公式计算值为１２只，ＰＡＳＳ软件Ｓｉｍｐｌｅ法计算值为８只见图１，Ｓｔａｔａ软件计算值为１０只由于软件界面图较复杂，本文不截取界面图。 　　２．３实验结果本实验研究向广州医学院病理教研室咨询了实验材料的费用，根据以往的文献研究经验并考