临床标本收集及保存.docxVIP

临床样本的收集与保存 样本类型 采集方法 处理方法 保存方法 血液样 本 根据研究需要采集治疗前，治疗中及治疗后的空腹外周静脉血。 采集时尽量选择与其他常规检验同时进行 分别采集抗凝血（依据研究目的选择抗凝剂）和非抗凝（干燥或促凝）血液样本 肿瘤?血液样本采集英确保放/化疗前有进行 血浆样本分离应进行两次离心 依据科研需求确定样本份数。 分离提取血浆、血清、白细胞层、血凝块进行分装，每例样本不少于3份。 血清/血浆：分装3管，0.5ml/管。 血凝块:分装2管，1cm^3/管。 EDTA抗凝：用于DNA提取、淋巴母细胞系建立和蛋白组学研究。分装3管、0.5ml/管 血清：室温血凝后≤30min内进行分离、分装；4℃，24h内进行分离、分装。 血浆：4℃，24h内进行分离、分装。 全血/血清/血浆/血凝块≤-80℃长期保存。 外周血单个核细胞样 本 血液样本用EDTA抗凝采集 全血样本采集后应尽快用淋巴细胞分离液分离单个核细胞 分离后的单个核细胞应加入细胞冻存液，并利用程序降温仪或程序降温盒进行梯度降温。 冻存液配置为90%FCS+10%DMSO 依据科研需求确定样本份数。 水平室温离心分离PBMC，4℃低温洗涤。 分离后单个核细胞加入细胞冻存液，混匀后进行分装，每管0.5ml。 单个核细胞：4℃，24h内进行分离、分装。 分装后≤-150℃液氮中保存。 组织样 本 样本采集严禁影响临床病理诊断。肿瘤直径≤1cm^3不建议采集或在病理医生指导下采集，采集部位应与用于石蜡切片相一致。 样本采集应在离体后30min内完成采集，采集时应避免坏死区及纤维化区，肿瘤细胞应50%。 样本采集时应在洁净环境中操作，保存RNA时应尽量在无菌环境下进行；采集不同样本时应更换采集器材、防止交叉污染。 4.采集顺序：标明“远癌-近癌-癌灶”顺序，正常组织（距癌灶边缘3cm或最远端）→癌旁组织（距离癌灶边缘3cm）→癌组织 采集后样本置于液态液氮中应使用内旋式冻存管，置于气相液氮或-80℃冰箱中可使用外旋式冻存管。 每份肿瘤样本应有配对的血液样本。 依据科研需求确定样本份数。 肿瘤、瘤旁及非瘤（正常）组织各2-3份。 石蜡/OCT样本1份或5张组织切片，用于形态学对照。 需留取质控样本（）留取份数依据科研目的而定） 每份样本应≥0.5cm^3或300mg或1*10^7细胞。 石蜡样本不小于0.5*0.5*0.2cm。 样本/福尔马林液比例应≥1/5。 样本置于液氮内转运。 石蜡样本置于中性福尔马林中常温转运，尽快制成蜡块。 RNA later样本常温转运（≤24h），≤-20℃保存。 OCT样本≤-20℃保存。 新鲜组织样本置于液氮中保存。 培养细胞样 本 采集容器应无菌、干燥、洁净、具有防漏瓶盖。 吸出培养皿培养液，用PBS冲洗2次，加入胰蛋白酶37℃消化1min。 除去胰蛋白酶，加入5ml培养液混匀后取出细胞液进行离心。 除去上清液后加入细胞保护剂0.5ml，胎牛血清0.5ml及DMSO 0.1-0.2ml混匀放入内旋式冻存管内，进行程序降温。 干细胞保存加入特定细胞培养液及高浓度胎牛血清。 依据科研需求确定样本份数。 每皿细胞对应1个冻存管保存。 传代细胞建议取处于指数生长期、较大瓶皿培养的80%-90%汇合单层细胞。 收集培养液时，1000g/min离心5-10min。 加入胰蛋白酶后需放入恒温箱37℃恒温1min。 样本置于液氮内转运。 ≤-150℃长期保存。 尿液样 本 采集容器应无菌、干燥、洁净、具有防漏瓶盖。 进行毒理分析时应使用高密度聚丙烯类容器。 检测特殊分析物时应在分管前加入EDTA或焦亚硫酸钠等防腐剂。 避免经血、白带、精液、前列腺液、粪便污染。 特殊样本应避光保存 建议采集首次晨尿。 尿液样本含有细胞碎片等杂质，应进行离心。 尿液内细胞采集/分离方法同血液样本。 不同时段尿样研究方向：首次晨尿：白细胞、红细胞和激素浓度较高；随机尿样：适合常规筛查和细胞学检测；分级尿样：适用于分析物浓度；定时尿样：可用于比较生物分子排泄模式。 依据科研需求确定样本份数。 尿液样本≤100ml。 分装5管，1ml/管。 尿液样本可处理为：全尿。 常温保存：≤4h 0-4℃≤24h。 全尿≤-80℃长期保存. 细胞≤-150℃长期保存。 粪便样 本 粪便应取新鲜标本，盛器应洁净，不得混有尿液，不可有消毒剂及污水。 采集标本时应用干净的竹签选取含有粘液、脓血等病变成分的粪便；外观无异常的粪便需从表面、深处及粪端多处取材，其量至少指头大小。 冷冻采集后的样本 依据科研需求确定样本份数。 采集量≥30g。 分装3管，10g/管。 冷冻干燥保存。 2≤-80℃长期保存. 胆汁样 本 采集容器应无菌、干燥、洁净、具有防漏瓶盖。 采集清晨胆汁、采集时尽量选择与