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不同发芽条件对阳春砂种子发芽的影响 【摘要】【目的】比较不同发芽条件 及赤霉素引发对阳春砂种子发芽的影响。【方法】以阳春砂种子为材料,比较光照条件、不同发芽床(基质)、不同培养温度对种子萌发的影响;以不同浓度赤霉素(GA3)处理,观察外源激素对阳春砂种子萌发的影响。【结果】(1)阳春砂种子的萌发需要光照。(2)种子在湿润滤纸上的发芽率和发芽势明 显优于MS培养基。(3)25℃~30℃培养有利于种子的萌发。(4)400 mg/L的GA3引发有 利于促进阳春砂种子的萌发,缩短发芽时间。【结论】适合阳春砂种子萌发的温度范围为25℃~30℃,在湿润滤纸上进行光照培养, 并用400 mg/L GA3引发,有利于快速获得大量阳春砂苗。 【关键词】阳春砂/生长和发育;种子;植物芽 砂仁是我国着名的“四大南药”之一,具 有重要的药用价值。其主流品种阳春砂仁,为姜科Zingiberaceae豆蔻属Amomum植物阳春砂Amomum villosum Lour.的干燥成熟果实[1]。阳春砂在田间多以分株繁殖为主,但分株繁殖受地域限制,不利于种质资源的运输、保存和利用。长期进行分株繁殖也不利于阳春砂种质的更新。阳春砂另一种重要繁殖方式是种子繁殖,即通过种子培养无菌苗提供外植体,经过进一步的诱导获得愈伤组织或再生芽。以实生苗取材污染率太高,以种子培养无菌苗作为外植体可以减少污染,利于对其进行愈伤组织培养及转基因等研究。但阳春砂种子萌发率低,发芽时间长,使实验受到很大限制。张雅明等在由阳春砂种子获得无菌苗时,种子发芽率仅而且萌发时间长,故认为砂仁无菌播种萌发条件尚需进一步优化。 本文采用不同发芽条件及运用种子引发技术处理阳春砂种子,探讨影响阳春砂种子发芽的关键因素,建立阳春砂种子快速发芽和提高种子发芽率的有效方法,为阳春砂的组织培养和种苗繁育提供参考。现将结果报道如下。 1材料与方法 实验材料 阳春砂完全成熟果实取自广东省阳春 市蟠龙管理区,2007年8月采收,除去果皮及果肉,晾干种子后,密封保存于4℃。 仪器及试剂 智能人工气候培养箱(杭州钱江仪器设备有限公司);赤霉素(GA3,上海伯奥生物科技有限公司)。种子的前处理用等量细沙磨擦,除去阳春砂种子的假种皮,磨至有浓烈砂仁香气。种子用kg/L浓硫酸浸泡3 min,无菌水洗至中性,备用。 发芽期间光照的选择 选择温度为30℃,以湿润无菌滤纸为发 芽床,进行种子光照(1 600 Lx,12 h/d)与避光的培养,每个处理涉及80粒种子,4个重复。 发芽床的设定 选择温度为30℃,在湿润无菌滤纸(加 入2~3 mL无菌水)和MS培养基上分别进行发芽实验,光照培养,每个处理涉及80粒种子,4个重复。 发芽最适温度的考察 设20℃、25℃、30℃、35℃共4个温度处理(分别为1、2、3、4组),将种子置于铺有湿润无菌滤纸的培养皿中,光照培养,每个处理涉及80粒种子,4个重复。 引发对阳春砂种子发芽的影响GA3设0、200、400、600、800 mg/L共5个浓度梯度,将前处理过的种子浸于一定量的GA3溶液中,密封,室温放置24 h后,取出种子,置于铺有湿润无菌滤纸的培养皿中,30℃光照培养,每个处理涉及80粒种子,4个重复。 2010年第27卷广州中医药大学学报刘艳,等.不同发芽条件对阳春砂种子发芽的影响第3期刘艳,等.不同发芽条件对阳春砂种子发芽的影响第4期2010年第27卷广州中医药大学学报记录项目 记录种子发芽始期、播种40 d(初次统计)和70 d(发芽试验终期)的正常发芽种子数。 统计学方法 采用统计软件进行数据的统计分析。相关数据计算公式参考文献。多组计量资料组间比较采用方差分析及两两 比较,检验水平α。发芽率 pGR=(n1/N)×100%(n1为发芽试验终期正常发芽的种子数,N为供试种子总数);发芽势pGE=(n2/N)×100%(n2为初次统计正常发芽的种子数,N为供试种子总数)。 2结果与分析 发芽期间光照的选择 表1结果显示:黑暗组和光照组种子的发芽率(pGR)和发芽势(pGE)比较差异有显 着性意义光照条件下种子发芽快,发芽率高,提示光照条件更利于阳春砂种子的萌发。表1光照对阳春砂种子发芽的影响发芽床(基质)的选择 从表2可以看出,以湿润滤纸为基质,种子的发芽率和发芽势显着高于接种于MS培养基中的种子。表2两种基质对阳春砂种子发芽的影响(±s) 发芽床Nt发芽始期/dpGR/%pGE/%MS培养基湿润