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【解析】自养型微生物需要无机碳源,异养型微生物需要的是有机碳源,不同种类细菌的生长需要不同的碳源,A项错误;要获得细菌单菌落只能用固体培养基,B项错误;细菌芽孢是帮助细菌度过不良环境的结构,形成于稳定期,C项错误;大部分细菌不能在含有高浓度NaCl的培养基中生存,而金黄色葡萄球菌可耐高浓度NaCl,所以培养基中含有高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选,D项正确。 * 中华民族有着五千多年的文明历史,中华民族在世界上是一个非常卓越和伟大的民族。我们有过繁荣昌盛的唐朝,有过强盛无比疆域辽阔的汉朝和元朝,更有灿烂美丽的唐、宋文化 第1讲 微生物的培养与应用 一、微生物的培养与应用 1.微生物的实验室培养 (1)培养基 ①概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。 ②分类 a.按培养基的物质性质可以分为液体培养基、固体培养基和半固体培养基。 b.按培养基的化学成分可以分为天然培养基和合成培养基。 c.按培养基的用途可以分为基本培养基、选择培养基和鉴别培养基。 ③培养基配方及营养要素 基本营养要素:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐。此外还要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。 【友情提醒】①微生物最常用的碳源是糖类,尤其是葡萄糖;最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。 ②对异养微生物来说,含C、H、O、N的有机化合物既是碳源,又是氮源、能源。 ③有些培养基不需要添加特殊营养物质,生物自己能合成,如大肠杆菌能合成某些维生素,作为特殊营养物质。 ④制备:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。 无菌技术主要操作要求 a.实验前应对操作空间、操作人员消毒,对所用器具和培养基灭菌。 b.实验进行时需在酒精灯火焰周围无菌区操作,另外要避免已灭菌处理材料再次污染。 (2)无菌技术 2.纯化大肠杆菌以及菌种的保藏 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。 (2)纯化大肠杆菌 ①原理:在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。 ②方法:平板划线法、稀释涂布平板法。 平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面;稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。 (3)菌种的保藏 ①短期保存:固体斜面培养基上4 ℃保存,菌种易被污染或产生变异。 ②长期保存:-20 ℃甘油管在冷冻箱中保藏。 【友情提醒】平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的温度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发;又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。 【例1】分析下面培养基的配方:KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂。请回答: (1)在该培养基的配方中,为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是________和________。 (2)想一想这种培养基对微生物是否具有选择作用?如果具有,又是如何进行选择的? ____________________________________________。 (3)培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌及消毒方法依次是( ) ①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线灭菌 ⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消毒法 A.⑤③②①④⑥ B.①②③④⑤⑥ C.⑥②③④①⑤ D.③④②①⑥⑤ 【解析】碳源是提供碳元素的物质,氮源是提供氮元素的物质。所以碳源是葡萄糖,氮源是尿素。绝大多数生物都能利用葡萄糖,但是,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,所以这种培养基对微生物有选择作用。选择的原则是只有能够利用尿素的微生物才能够生长。培养基用高压蒸汽灭菌;培养皿能耐高温,可用干热灭菌;接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果;实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒,如用酒精擦拭双手;空气可用紫外线消毒;牛奶为不破坏其营养成分可采用巴氏消毒法。 【答案】 (1)葡萄糖 尿素 (2)有选择作用。因为此配方中尿素是惟一氮源,因此,只有能够利用尿素的微生物才能够生长 (3)A 二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1.分离的原理 土壤中的细菌能合成脲酶,能把尿素分解成无机物。 2.分离分解尿素的细菌所
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