家蚕BmNADK基因的克隆分析及其与家蚕高温应激反应的相关研究-特种经济动物饲养学专业论文.docxVIP

家蚕 家蚕 BmNADK 基因的克隆分析 中文摘要 中文摘要 NAD kinas（e NADK）是唯一一个能够从头合成 NADP+的酶，其能利用 ATP， 催化 NAD+和 NADH 发生磷酸化，生成 NADP+和 NADPH。本文利用 RT-PCR、 qRT-PCR、RNAi 和酶活的测定等技术，研究 BmNADK 基因在家蚕自身氧化还原 系统中的调控机制；进一步探究了 BmNADK 基因在同一家蚕品种 5 龄的不同发 育阶段高温应激反应表达机制和不同抗高温家蚕品种的表达差异。结果如下： 1 家蚕 NADK 基因的克隆及其会下调使得 NADPH 含量和 GSH 含量下降 利用 RACE 技术，分别延伸 NADK(SilkDB 登录号为 BGIBMGA007449-TA) 基因的 5′及 3′端序列，并获得了 NADK 基因的 cDNA 序列，定位在 3 号染色体， 与玉带凤蝶的基因进化距离最近。本文还对家蚕 5 龄幼虫期 NADK 基因进行了 时空表达分析，发现其在摇摆期的表达量较高；我们选择在摇摆期对其进行 RNAi 实验，结果表明，伴随这 NADK 基因表达量的下降，其摇摆期的时间会有所缩 短；NADPH、NAD+、NADH、NADP+的含量以及 GSH 和 H2O2 的含量调查发现， NADPH 的含量和 GSH 的含量下降，H2O2 和 NAD+的含量上升。说明 NA