课件：生产菌种的来源ppt.ppt

- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - ? 其要领是提供一些有利于所需菌株生长或不利于其他菌型生长的条件，例如，供给特殊的基质或加入某些抑制剂。 控制氧可将好氧微生物和厌氧微生物分开； 高温下培养可将嗜热微生物和非嗜热微生物分开； 控制pH可分离嗜酸或嗜碱微生物； 高糖或高盐培养基可分离耐高渗透压微生物； 在分离培养中加入抗生素或某试剂可增加选择性 如分离真菌可在土豆培养基中加入链霉素； 分离细菌或放线菌可在培养基中加入制霉菌素等 2019 - * 定向培养的方法 物理方法：加热、膜过滤等 主要培养的方法:平板稀释法和平板划线法(常规法) 2019 - * 定向培养的富集方法 1、底物 2、pH条件 3、培养时间 4、培养温度 等一切能提高目的微生物相对生长速度的手段，培养（固体、液体、分批、连续）后使目的微生物在种群中占优势。 2019 - * 菌落的选出 从产物角度出发 在培养时以产物的形成有目的---设计培养基 利用简单、快速的鉴定方法，如抗生素 从形态的角度 菌落的外观形态，是微生物的一个重要表征。如多糖产生菌在适当的培养基上生长，从具有粘液性的菌落外观上就可以初步识别。 2019 - * 实例：碱性纤维素酶产生菌的筛选（国家七五攻关项目） 采样（造纸厂） →80度30分钟处理 文献: 产生菌为中性牙孢杆菌，嗜碱牙孢杆菌、放线菌及霉菌 0.0075%曲利本蓝＋1%CMC（羧甲基纤维素），pH10.5 培养3～4 d，选择有凹陷圈的菌落 从285个土样中获得62株 26株为组成型 36株为诱导型 ↓ 2019 - * 例：醛肟水解酶的筛选（诱导） --Journal of biotechnology 94(2002), 65-72 培养基中含0.05% of Z-PAOx（苯基乙醛肟) 每隔2-3天移去一半培养物，补充新鲜培养基 不断分析样品，2-3个月后，Z-PAOx降低，稀释分离挑菌落 2019 - * * 抗生素产生菌的分离 抗肿瘤药物产生菌的分离 酶抑制剂产生菌的分离 抗病毒药物产生菌的分离 生长因子产生菌的分离等 2、随机分离 2019 - * * （1）抗生素产生菌的分离 抑菌圈法等。 试验菌的选择是关键（关系到灵敏度、活性、抗菌谱等） 2019 - * * （2）抗肿瘤药物产生菌的分离 ? 临床上有效的抗肿瘤药物大多是直接作用于核酸或抑制核酸生物合成的物质。SRB MTT ? 大部分具有抗菌或抗真菌的活性。 现发展出利用微生物筛选作用于DNA的抗肿瘤药物的方法，如生化诱导法、SOS生色检测法、DNA修复能力突变株。 原理是利用DNA的损伤，微生物发生突变。 2019 - * * （3）酶抑制剂产生菌的分离 ? 某些酶与病理相关。 ? 如果某种化合物能在体外抑制某关键的人体酶，它就可能在体内有药理作用。 ? 选择与生理和病理关系明确的酶作为靶酶。 靶区 靶酶 抗高血压 血管紧张素转移酶 抗糖尿病 ?-淀粉酶、蔗糖酶等 抗血脂症 缩合酶 抗组氨 组氨酸脱羧酶、组氨-N-甲基转移酶 2019 - * * （4）生长因子产生菌的分离 通过观察分离菌能否促进营养缺陷型菌株的生长，来检测生长因子产生菌。 分离培养基上培养 被杀死的菌落周围有无检测菌的生长圈 影印到能支持生