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动物源性食品中兽药残留快速检测技术研宄进展
随着畜牧业规模化和产业化,为了防止群体染病事件的发 生,同时为了追求利益的最大化,养殖过程中兽药的使用量 和使用范围逐渐被扩大化,国家对于兽药的安全使用有很多 规定,但因为养殖者对法律法规及相关标准的不了解或受到 利益的驱动,滥用、误用兽药,极易造成兽药残留超标。食 品安全监控体系不断发展完善,但兽药残留依然是动物源性 食品中安全监管的重点和热点。我国国家标准中兽药残留的 检测方法有气相色谱法、液相色谱法、薄层色谱法、气相色 谱-质谱联用法、液相色谱-质谱联用法等[1],但是这些方法 存在预处理复杂、需要配备昂贵的大型仪器、操作繁琐、对 人员素质要求高、试验成本高等缺点,不利于进行食品安全 监管的现场快速检测;而一些快检技术具有快捷、简便、成 本低等特点,被广泛运用。对近几年动物源性食品中兽药残 留快速检测技术进行综述,重点介绍了酶联免疫技术、生物 芯片技术、生物传感器技术、拉曼光谱检测技术等快速检测 技术,并对快速检测技术在食品分析领域中,尤其是动物源 性食品中兽药残留的应用前景进行了展望。
1免疫技术 酶联免疫技术
酶联免疫技术是由免疫技术与现代测试手段相结合而 建立的一种超微量测定技术[2],对于兽药残留的检测一般采 用3种竞争分析模式,即抗体包被直接竞争、抗原包被直接 竞争和间接竞争[3]。Wang L等人[4]进行胶体金吸附和酶联 免疫吸附交叉试验,这种方法获得良好的相关性,可以快速 测试动物源食品中14种磺胺残留。王忠斌等人[5]建立了氨 基糖苷类抗生素多残留的直接竞争ELISA分析方法,快速检 测新霉素、卡那霉素、庆大霉素、链霉素等兽药中常用的氨 基糖苷类抗生素。王自良等人[6]研制的苯巴比妥ELISA试 剂盒,线性检测范围广,达?ng/mL,灵敏度高,检测限低。 王选年等人[7]研制的盐酸克伦特罗ELISA试剂盒,线性检 测范围为?ng/mL,与肾上腺素、去甲肾上腺素、莱克多巴 胺及多种抗生素均无交叉反应性。
1.胶体金免疫技术
胶体金免疫技术起步于20世纪70年代,具有体积较 小、操作简单、出具结果快等特点。近年来,胶体金免疫层 析技术发展很快,已应用在小分子物质的检测上。ZhuY等 人[8]研制出检测12种喹诺酮类药物在鸡肉和鸡肝中残留的 免疫层析试纸条,在能识别氟喹诺酮药物的单克隆抗体基础 上,成功研制出了可以同时检测12种氟喹诺酮类药物的胶 体金快速检测试纸条。诺氟沙星及培氟沙星在鸡肉和鸡肝中 的检测限为2ng/L,恩诺沙星、环丙沙星、氟甲喹、氧氟沙
星、依诺沙星、洛美沙星、达氟沙星、氨氟沙星、恶喹酸及 麻保沙星在鸡肉和鸡肝中的检测限达到50(ig/kg,整个过程 在10 min之内完成。刘烜等人[9]采用免疫竞争法研制出一 种快速检测喹诺酮类药物残留的免疫层析法,在检测肌肉等 组织样品时,灵敏度最低值为10 ng/mL,只需3?min,与 类似物无交叉反应。
1.化学发光微粒子免疫技术
化学发光微粒子免疫技术是近年来发展较快的新型检 测技术。克伦特罗也称“瘦肉精”,快检方法多为酶联免疫法。
牛治存等人[10]应用化学发光微粒子免疫分析技术研发克伦 特罗化学发光快速检测试剂盒,采用直接竞争CMIA方法, 配合贵州勤邦食品安全科学技术有限公司研制的磁免疫全 自動化学发光检测仪,用光子计数仪测定光子计数的强度与 克伦特罗药物浓度负相关得出克伦特罗的含量。党娟等人[11] 运用化学发光微粒子免疫法对牛肝、牛肉样品中阿维菌素类 药物残留进行检测,结果表明检测灵敏度与可测范围远远高 于酶联免疫法,且兼具了 ELISA法的简便操作和短时反应等 性能。
生物芯片技术
生物芯片技术使用了微光技术,根据分子间特异性相 互作用的原理,将不连续的分析过程集成于硅芯片、玻璃芯 片等,进入计算机系统,以实现对细胞、蛋白质、基因及其
他生物组分的检测[12]。分别为基因芯片、蛋白质芯片、细 胞芯片等,其中以蛋白芯片发展最为迅速。陈爱亮等人[13] 开发了兽药残留蛋白芯片检测系统,该系统可用于猪肉、猪 肝、鸡肉、鸡肝、牛奶中磺胺二甲基嘧陡、磺胺喹恶啾、礦 胺甲恶唑、磺胺异恶唑、磺胺间甲氧嘧啶、链霉素、双氢链 霉素、恩诺沙星、氯霉索的定量检测,可同时分析多种样品 的多种兽药残留。刘楠等人[14]以常用的氯霉素、克伦特罗、 雌二醇和泰乐菌素4种兽药为靶标物,基于间接竞争法的免 疫学检测原理,改进了常规悬浮芯片技术在微球上固定抗体 的方法,根据待测靶标物灵活自由组合,同时检出上述4种 兽药残留靶标物联盟,整个检测过程仅耗时1?h。因生物芯 片技术通量高、特异性强、灵敏快速等特点,使其在兽药残 留的检测领域得到更多运用者的关注。生物传感器技术 生物传感器是由化酶或电化学或物理传感器组成的一 种
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