疾病蛋白标志物与基因突变检测电学式生物传感器新方法研究-分析化学专业论文.docxVIP

硕士学位论文 摘亵 随着生物传感榕在环楠、食品、医药和革事等方面应用范围的扩大，回而吸 引了众多研究者的兴趣。为了我得高提敏腹、挥生性好、 f民成本的生物传感器， 我们对此做了捕关研究。本论文主费基于电化学和压电晶报技术，设计建立了凡 种新型生物传感器技术，实现肿瘤及遗传娟的准确、快速、简便的检测。主要内 容如下: (1)报道了一种新型的基于应电免疲概集的肿瘤标志物…一人撒满甲黯蛋白 (AFP) 的快速传感技求 !比万法的基本黑湾是表面鳞鳞了兔抗 AFP 多克黯拭体 的纳米脂脑体 ey 与:t价抗照 AFP 发生特异性兔疲识别，诱导免疫脂质体产生特异 性黯集反班，并引起溶液站度变化，该粘度变化可采用应电传感器的瞬应频率变 化而进行监瓣。为了消除干扰蛋白质成静的非特异性极的，可用牛血洁白蛋白 (BSA)静锦? 电传感器我黯，并在分析介股中引入高撒皮 BSA以降俄诗景干扰。 我们考烧脂质体的组成，分析介质中脂旗体浓成与黯乙二醉 (PEG)浓度搏的影 响。结果表明，人血清 AFP 的陈庭在0.06 5μgmL l 时， ì哀思电免疫传感器的额 移与AFP 的浓度成战性关系，检攒下报为 60 吨 mLelo (2) 我们提出了…种新型幕于脂肢体界面凝集、对稳乱造毒素的快速检涮 ? 电 生物传感器。我们首先在金电极表白楼铺一层长键;烧娃磁醉，然后在表窜铺黑悔 有神经节背脂的文撵磷脂膜。当存在霍乱潜素肘，黯乱母戴会被品报表嚣的神能 节背路擒挠和潜液中磷路搜泡的神组节昔脂捕获，从商产生特异性凝集反应。这 样悔液的痛度和粘度变化，而且会增强石部晶报表丽质最响应变化，最搀石英晶 振的响应频事会大制降低。除了通过响应频率来最化瞿乱母素，我们也可以通过 初始阶段的躏应琐事速度( LJ.F/6S) 来检测霍乱毒素。蹒 E泣频率速皮在棋迷检撒 实验有着特殊的意义。 i卖方法对霍乱悔素的检测?在即!是 0小5 g mL.1 ，检测下限为 25吨 mIIo 支撑确黯膜不但对人血清蛋白没有吸附，部且能够迅迷 。M) utS 蛋白是DNA 修复系筑中的一个意要部分，它能够准确的识别并结合 所有的单碱基错配，以及 1-4磁基插入和锻失形成的本钱艘于其它蛋白质或辅助园 子的各种结构的 Loop环。我们利用 MutS 蛋白能够特异性结合单碱慕锚配双眼 DNA 和亚甲基蓝只嵌入双链 DNA 的特点，建立了…种新型电化学单碱提突变检测方 法。黯为 MutS只与单碱基错配政锵 DNA特异性结合，这种检黯方法的背景很低。 该方浩成功地实现了扑地中海基囚的 -28位点的单个碱基突变的识别，且检测限地 到5.66x 10-13M ，此方法对点突变的检测具有快速、高灵敏皮、成本低的特点。 羔键语 z 压电先主变凝集:耶路蛋白:黯嚣体:基嚣突变:生物传攘攘 II 电学式生物传感吉普革开 1I法!I汗究 Abstract There has 如een considerable interest in studying 悦。sensors 如ecause they can 如e applied to a wide range of environmer此，foodstuff ，medicine and military affairs， etc.We have studied on sensitive 、reusable and low cost biosensor.This paper develop several novel biosensor technique which can exactIy ，rapidly and simply detect tumour and genetic diseases base the technique of electrochemistry and piezoelectricity.The detail contents are as follows: (1) A novel piezoelectric immunoagglutination assay (PEIA) technique with antibodymodified liposome has been developed for direct quantitative detectíon of human AFP. This technique is based on specific agglutination of ra如bit-anti-AFP-coated liposome in the presence of the