丙酸钠对IPEC￣J2细胞紧密连接及炎症细胞因子的影响.PDF

－ 　 南京农业大学学报　 ２０１９ꎬ４２(１):１３７ １４４ ｈｔｔｐ:/ / ｎａｕｘｂ.ｎｊａｕ.ｅｄｕ.ｃｎ 　 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＮａｎｊｉｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ＤＯＩ:１０.７６８５/ ｊｎａｕ.２０１８０４０３０ － 张亚南ꎬ李轩ꎬ陈慧子ꎬ等. 丙酸钠对ＩＰＥＣ￣Ｊ２细胞紧密连接及炎症细胞因子的影响[Ｊ]. 南京农业大学学报ꎬ２０１９ꎬ４２(１):１３７ １４４. 丙酸钠对ＩＰＥＣ￣Ｊ２细胞紧密连接及炎症细胞因子的影响 ∗ 张亚南ꎬ李轩ꎬ陈慧子ꎬ余凯凡 ꎬ朱伟云 (南京农业大学国家动物消化道国际联合研究中心/ 江苏省消化道营养与动物健康重点实验室/ 动物科技学院ꎬ江苏 南京 ２１００９５) 摘要:[目的]本文以猪肠道上皮ＩＰＥＣ￣Ｊ２细胞为模型ꎬ探究不同水平丙酸钠对细胞紧密连接和炎症细胞因子的影响ꎮ [方法] －１ 分别用１和１０ｍｍｏｌＬ 丙酸钠处理ＩＰＥＣ￣Ｊ２细胞ꎬ以不加丙酸钠处理ＩＰＥＣ￣Ｊ２细胞为对照组ꎬ分别处理１２ｈ和２４ｈ后测定各 组细胞活力、跨膜电阻(ＴＥＥＲ)值、紧密连接相关蛋白及炎症细胞因子基因表达和细胞上清液中炎症因子浓度ꎮ [结果]丙酸 钠处理２４ ｈ后ꎬ处理组细胞活力显著下降(Ｐ０.０５)ꎬ细胞的ＴＥＥＲ值则显著上升(Ｐ０.０５)ꎮ ＲＴ￣ｑＰＣＲ结果显示ꎬ紧密连接相 关蛋白Ｃｌａｕｄｉｎ 中ꎬ不同浓度丙酸钠处理 １２和２４ ｈ后ꎬ显著下调 Ｃｌａｕｄｉｎ￣１ ｍＲＮＡ 的表达(Ｐ０.０５)ꎬ但显著上调 Ｃｌａｕｄｉｎ￣２、 －１ Ｃｌａｕｄｉｎ￣３和Ｃｌａｕｄｉｎ￣４ ｍＲＮＡ 的表达(Ｐ０.０５)ꎮ 紧密连接相关蛋白ＺＯ中ꎬ处理１２ 和２４ ｈ时ꎬ１和１０ ｍｍｏｌＬ 丙酸钠分别显 －１ 著上调ＺＯ￣２ｍＲＮＡ和ＺＯ￣１ｍＲＮＡ 的表达(Ｐ０.０５)ꎬ但１０ ｍｍｏｌＬ 丙酸钠则显著下调ＺＯ￣２ ｍＲＮＡ 的表达(Ｐ０.０５)ꎮ 不同 浓度丙酸钠处理１２和２４ ｈ均显著上调炎症细胞因子ＩＬ￣８、ＩＬ￣１８和ＴＮＦ￣α ｍＲＮＡ 的表达(Ｐ０.０５)ꎬ显著下调ＩＬ￣６ｍＲＮＡ 的表 达(Ｐ０.０５)ꎮ ＥＬＩＳＡ测定结果表明ꎬ丙酸钠显著刺激ＩＬ￣８和ＴＮＦ￣α 的分泌(Ｐ０.０５)ꎬ对ＩＬ￣１８和ＩＬ￣６的分泌则无显著影响 (Ｐ０.０５)ꎮ [结论]丙酸钠选择性上调紧密连接蛋白家族相关基因的表达ꎬ一定程度上维护小肠上皮细胞屏障功能的完整性ꎬ 同时调节细胞炎症反应ꎬ揭示丙酸在调节小肠上皮细胞屏障功能以及炎症反应过程中发挥重要作用ꎮ 关键词:丙酸钠ꎻ紧密连接ꎻ炎症细胞因子ꎻＩＰＥＣ￣Ｊ２细胞 － －