环氧合酶2抑制剂在重症急性胰腺炎大鼠模型中作用机制的研究-外科学专业论文.docxVIP

头的lml空针穿刺针于十二指肠乳头附近穿刺十二指肠降部外侧壁，自十 头的lml空针穿刺针于十二指肠乳头附近穿刺十二指肠降部外侧壁，自十 二指肠乳头逆行刺入胰胆管末端lcm，在近肝门处用无损伤性小动脉夹夹 闭胰胆管近肝门端，注入5％Tc—Na(注射速度0．1ml／min)，注完后5min检 查并确认大鼠局部胰腺组织出现充血水肿后拔出注射针，松开动脉夹，确 认腹腔无活动性出血后两层关腹，背部皮下注射生理盐水(2ml／1009)以补 充术中丢失水分。SO组处理同SAP组，但胰胆管内注射等量生理盐水。 SC组大鼠在术配制新鲜的O．5％Celecoxib溶液，以50 mg／kg体重的剂 量在SAP诱导前2小时灌胃，后续操作同SAP组。各模型组一次穿刺未成 功及术中死亡者淘汰。各组15只大鼠分3h，6h，12h三个时间点，每个时间 点5只开腹检验。开腹观察胰腺变化，测腹水变化情况，心脏采血约3～ 5ml，提取血清，血清样本保存于-200C，以备后续检测。取胰头部组织，用 4％多聚甲醛浸入固定24h，石蜡包埋、切片。各组大鼠放血致死后取肺组织 置800C烤箱连续烘烤24h，计算其湿／干比值。全自动血生化分析仪检测血 清淀粉酶，并采用ELISA法测定血清TNF—Q、IL-6、IL-10等细胞因子。 肉眼观察胰、肺组织出血、．水肿等变化；HE染色，光镜观察胰腺组织病理 学改变。结果：1．腹水：SO组无血性腹水； SAP组、SC组均有血性腹水， 各时间点SC组腹水量低于SAP组，有统计学意义(p=O．008)。2．血清淀粉 酶：SO组血清淀粉酶活性较低，各时间点均低于其它两组(p p=0．005)：SC 组各组水平较SAP组降低，但只在6h、12h有统计学意义(p=0．002)。3． 血清细胞因子：SO组血清TNF—a、IL-6和IL-10浓度显著低于SAP组和 SC组，有统计学意义(pO．01)；SC组TNF—Q、IL一6和IL一10浓度低于 SAP组，TNF—a、IL-10各时间点均有统计学意义(p0．05)；IL一6在6h、 12h有统计学意义(pO．05)。4．肺的湿／干重比值：SO组各时间点比值低 12h有统计学意义(pO．05)。4．肺的湿／干重比值：SO组各时间点比值低 于SAP组和SC组，有统计学意义(P=O．043)；SC组各时间比值低于SAP 组，在6h、12h有统计学意义(P=O．023)。5．胰腺大体评分：SO肉眼观 无变化；SAP组各时间点病理评分均明显升高；SC组评分较SAP组下降， 在6、12小时差异有统计学意义(p=O．006)。6．胰腺组织学评分：SO组 胰腺组织病理改变不明显，SAP各组胰腺间质均可见炎性细胞浸润和红细 胞渗出，且随病情进展程度加重，3h组见胰腺间质有少量炎性细胞浸润， 腺泡细胞少量坏死；6h组胰腺间质大量红细胞渗出和炎性细胞浸润，腺泡 细胞广泛重度肿胀坏死；12h组坏死范围进一步扩大，可达整个小叶，但 小叶轮廓尚见；SC治疗组也可见明显胰腺病理改变，但较SAP组减轻，两 组各时间点均有显著性差异(p=O．003)。结论：1．细胞因子TNF—Q‘IL一6 及IL-IO的表达水平与SAP的严重度有关，在SAP疾病的发展中起着重要 作用。2．环氧合酶一2抑制剂可以下调TNF-a、IL-6及IL一10的表达水平， 降低了炎症因子的表达，改善了胰腺和肺组织的病理损伤。提示环氧合酶 一2抑制剂在大鼠SAP的发病机理中起着重要作用，该通路可以作为SAP治 疗的靶点，其抑制剂具有防治SAP的应用价值，但Celecoxib的应用在SAP 起病的2小时前使用，其预防胰腺炎的作用强于其治疗意义。 关键词：重症急性胰腺炎；环氧合酶一2抑制剂：细胞因子；Celecoxib； Research Research of mechanism of effect of Cyclooxygenase一2 inhibitors on SAP rats mode Abstract：Objective：Acute pancreatitis(acute pancreatitis，AP)usually presents arising fast，destroing severily,changing quickly,being more complications， especially severe acute pancreatitis(severe acute pancreatitis，SAP)is potential risks of high mortality rate．The occurrence of this disease is relation with ‘ pro—inflammatory cytok