积雪草化学成分的分离纯化及结构鉴定-细胞生物学专业论文.docxVIP

辽宁师范大学硕十学位论文{商 辽宁师范大学硕十学位论文 {商 要 中药具有悠久的文明历史，是中华民族几千年文化的结晶。它深受国内外科学家们 的关注和研究，近几年来它以“标本兼治”的独特理念和功效在现代药物开发中表现出 独特的重要性。中药的优点包括，其副作用较小，具有显著的药理作用等。然而，中药 体系并没有成为现代医学的主要药物体系，影响因素包括以下几个方面： (1)在许多 中草中，有效成分的化学结构还没有鉴定出来； (2)对于大多数的中草药，其靶分子 目标还没有确定下来； (3)有效化合物与靶分子目标之问的关系模型还没有建立起来。 影响上述的原因主要是由于对中药中单体化合物的提取是一个耗时的过程，周期较长。 因此对中药中有效成分的快速高效地提取与分离是中药研究领域中的一项重要内容。 积雪草为伞形科植物积雪草Centella asiatica的干燥全草，广泛分布于长江流域各 地，资源丰富。其化学成分主要包括三萜类化合物、烯类化合物、黄酮类化合物及挥发 油等。经确定这些化学成分具有广泛潜在的抗癌、抑菌等药用价值。近年来，天然产物 活性成分的分离和纯化深受国内外科学家们的关注。本文系统地对积雪草中有效的化学 成分进行了提取与分离，这为现代医学中破译有效的成分提供了坚实的技术支持。 本实验采用乙醇回流法对积雪草进行提取，并且利用大孔树脂法对积雪草总提取物 进行了初步的分离，并根据初步分离得到的粗提物的极性分成3组，积雪草较强极性粗 提物、积雪草中等偏弱极性粗提物、积雪草弱极性粗提物。利用凝胶色谱法、高速逆流 色谱法、制备型高效液相色谱法分别对积雪草各组粗提物进行了分离纯化，并利用了质 谱(MS)和核磁共振(NMR)氢谱、碳谱对所得的产物的化学结构进行了分析和鉴定。 目前，我们从较强极性积雪草粗提物中分离出4种化合物，分别是3，4一二羟基苯甲酸、 绿原酸、1，5一二氧咖啡酰奎宁酸、3，5．二氧咖啡酰奎宁酸，纯度分别为98．46％、100％、 99．23％、99．23％。对于中等偏弱极性积雪草粗提物利用HSCCC分离纯化，以石油醚． 乙酸乙酯．甲醇一水(5：5：4．8：5)两相溶剂系统作为高速逆流色谱的体系，转速850r／min， 流速为2．0mL／min。利用此条件成功地分离纯化出3种化合物，纯度分别为98．89％、 98．28％、96．22％，其中2种化合物分别为槲皮素和山奈酚，另一种化合物初步鉴定为多 羟基酚类化合物。这是首次利用高速逆流色谱法对积雪草中等偏弱极性化合物进行分离 纯化。在应用制备型高效液相色谱分离纯化弱极性积雪草粗提物的实验中，分离纯化得 到3种化合物。其中一种化合物纯度为98．56％，初步鉴定为乌苏烷类三萜化合物，另 两种成分为100％纯度的挥发油类化合物，分别为石竹烯和长叶烯。本实验所建立的针 对积雪草中不同极性粗提物采用不同的分离纯化方法，可同时快速高效地从积雪草中分 离纯化有效成分，为分离纯化其它中药的活性成分提供了技术依据。 积雪草化学成分的分离纯化与结构分析关键词：中药、积雪草、高效液相色谱、凝胶色谱、高速逆流色谱 积雪草化学成分的分离纯化与结构分析 关键词：中药、积雪草、高效液相色谱、凝胶色谱、高速逆流色谱 Isolation，Purification Isolation，Purification and Identification of Compounds from Centella asiatica Abstract Traditional Chinese medicine(TCM)has a long history of thousands of years．which is built on rich experience of herb users．Efficiency of these herbs was extensively confirmed not only by Chinese scientists but also by researchers worldwide．The concept of treating both symptoms and causes of diseases of TCM makes it especially important in modem drug development in recent years．Other advantages of TCM include lOW toxicity．all natural and have good disease coverage．However，TCM system has not become a major drug system in modem medicine due to the