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第三章 酶; 酶催化作用并不局限于活细胞内,在许多情况下,细胞内产生的酶需分泌到细胞外或转移到其它组织器官中发挥作用,如胰蛋白酶、脂酶、淀粉酶等水解酶。把由细胞内产生并在细胞内发挥作用的酶称为胞内酶,而将细胞内产生后分泌细胞外起作用的酶叫胞外酶。 ; 在本章节中把酶所催化的反应称作酶促反应,发生化学反应前的物质称底物(substrate),而反应后生成的物质称产物(product)。 ;1. 酶具有共同于一般催化剂的特征;酶促反应的速度比非酶促反应通常要快
105~1017 倍;用简单的实验证明酶的催化效率:;2. 酶不共同于一般催化剂的特征;2. 酶不共同于一般催化剂的特征; 酶催化的专一性(specificity):是指酶对它所催化的反应及其底物具有的严格的选择性。通常一种酶只能催化一种或一类化学反应。;2 相对专一性—酶能催化在结构上类似的一系列化合物反应特怔。;2 相对专一性—酶能催化在结构上类似的一系列化合物反应特怔。;C 立体专一性(stereo specificity)—一种酶只能对一种立体异构体起催化作用,对其对映体则全无作用的特性。a.立体异构专一性:;C 立体专一性(stereo specificity)—一种酶只能对一种立体异构体起催化作用,对其对映体则全无作用的特性。B.几何异构专一性 :;Summry; 迄今为止所发现的4000多种酶中,现已有2500余种酶被鉴定出来,用于生产实践的酶有近200种,其中半数用于临床。 ;如 己糖激酶、蛋白酶、脲酶 ;如 己糖激酶、乳酸脱氢酶、DNA聚合酶 ;如 胃蛋白酶 ?; 这种命名法缺乏科学系统性,易产生“一酶多名”或“一名多酶”问题。如分解淀粉的酶,若按这种命名法则有三种名称,如淀粉酶、淀粉水解酶和细菌淀粉酶。
对于淀粉酶来说,强调的是底物;对淀粉水解酶来说,既强调底物又指出酶催化反应的性质;而细菌淀粉酶强调的是酶的来源和作用的对象。 ?; 该命名法规定,每种酶的名称应明确标明底物及所催化反应的特征,即酶的名称应包含两部分:前面为底物,后面为所催化反应的名称。 ; 2. 国际系统命名法; 国际酶学委员会规定,每个酶都有唯一的特定标码,其书写方式是:;乙醇脱氢酶的编码是: EC1.1.1.1
第一个“1”—— 第1大类,即氧化还原酶类;
第二个“1”—— 第1亚类,供氢体为CHOH;
第三个“1”—— 第1亚亚类,受氢体为NAD+;
第四个“1”—— 在亚亚类中的顺序号。; 国际系统命名法看起来科学而严谨,但使用起来不太方便. ;国际酶学委员会建议:
每个酶都给予 2 个名称;五. 酶的分类;五. 酶的分类;氧化-还原酶催化氧化-还原反应,催化氢的转移或电子传递。
主要包括脱氢酶(dehydrogenase)和氧化酶(Oxidase)。
如,乳酸(Lactate)脱氢酶催化乳酸的脱氢反应。;(1)脱氢酶类:催化直接从底物上脱氢的反应;(4)加氧酶(双加氧酶和单加氧酶);转移酶催化基团转移反应,即将一个底物分子的基团或原子转移到另一个底物的分子上。
根据X分类:转移碳基、酮基或醛基、酰基、糖基、烃基、含氮基、含磷基和含硫基的酶。
例如, 谷丙转氨酶催化的氨基转移反应。;水解酶催化底物的加水分解反应。
主要包括淀粉酶、蛋白酶、核酸酶及脂酶等。
例如,脂肪酶(Lipase)催化的脂的水解反应:;裂合酶催化从底物分子中移去一个基团或原子形成双键的反应及其逆反应。
主要包括醛缩酶、水化酶及脱氨酶等。
例如, 延胡索酸水合酶催化的反应。
;异构酶催化各种同分异构体的相互转化,即底物分子内基团或原子的重排过程。
例如,6-磷酸葡萄糖异构酶催化的反应;合成酶,又称为连接酶,能够催化C-C、C-O、C-N 以及C-S 键的形成反应。这类反应必须与ATP分解反应相互偶联。
例如,丙酮酸羧化酶催化的反应。
丙酮酸 + CO2 ? 草酰乙酸;六.酶的分离与提取;B. 材料的获取 ;C. 酶分离纯化的主要步骤;C. 酶分离纯化的主要步骤;C. 酶分离纯化的主要步骤;C. 酶分离纯化的主要步骤;酶活力:是酶促反应的能力。酶活力大小就是指在一定条件所催化的某一化学反应速度的快慢,即酶催化的反应速度越快,酶活力越高,反之则表示该酶活力低。 ;酶的定量并非对其蛋白质进行定量,而是对它的催化能力进行定量。;如何测定酶活力?;可见,反应速度只在最初一段时间内保持恒定,随着时间的延长,反应速度逐渐下降;常用的酶活力单位有三种:; B. Katal; C. 自定义的活力单位;指每毫克酶蛋白所含的酶活力单位数;纯化倍数 = 后续每次比活力/第一次比活力;1. 某酶在一定条件下,5 min内使30
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