生物制药( 五)教学精品.pptVIP

第五章 发酵工程制药 ;第一节 概述;一、微生物发酵制药的发展历史;二、微生物发酵制药的研究范围;四、制药微生物;2、制药微生物菌种的选育 ;自然选育： 在生产过程中，不经过人工诱变处理，根据菌种的自发突变而进行菌种筛选的过程，叫自然选育或自然分离。 自然选育的常用方法是单菌落分离，需要反复筛选，确定生产能力比原菌株高的菌种。 基本过程： 菌种→单孢子或单细胞悬液→适当稀释→琼脂平板分离→挑单个菌落进行生产能力测定→选出优良菌株。;3、 菌种保存;（1） 斜面低温保存;第二节 发酵过程及其优化控制 ;一、发酵制药的基本过程; 1、生产菌种选育 优良菌种应该高产、性能稳定、容易培养。 ;二、 发酵工艺条件的优化控制;（2）、 氮源;（3）、 无机盐及微量元素; 生长因子是指微生物生长不可缺少的微量有机物，包括氨基酸、维生素、核苷酸、脂肪酸等。 ;2、培养基的种类;按发酵过程中所处位置和作用分为：;(1)斜面或平板固体培养基（solid medium） ;（2）、 种子培养基（seed medium） 种子培养基是供孢子发芽和菌体进一步生长繁殖的培养基，包括摇瓶和一二级种子罐培养基，为液体培养基。 作用: 使种子扩大培养，增加细胞数目，生长形成强壮、健康和高活性的种子。 特点： 培养基成分完全，营养丰富，含有容易利用的碳、氮源和无机盐等，但总体浓度高。 ;（3）、 发酵培养基(fermentation medium) 发酵培养基是提供微生物进行目标产物的发酵生产的培养基，不仅要满足菌体的生长和繁殖，还要满足菌体合成目标产物，是发酵生产中最关键和最重要的培养基。 作用： 供菌体生长繁殖和合成大量代谢产物。 特点： 组成应丰富完整，营养成分浓度和粘度适中。;（4）、 补料培养基(fed medium) 补料培养基是发酵过程中添加的培养基。 作用： 稳定工艺条件，延长发酵周期，提高目标产物产量。 特点： 一般按单一成分配制，在发酵过程中各自独立控制加入，或按一定比例制成复合补料培养基，再加入。;3、影响培养基质量的因素;（二）、 温度对发酵的影响及其控制;2、 影响发酵温度变化的因素;3、 温度的控制;（三）、 pH的影响及其控制;3、 pH的控制;（四）、溶解氧影响与控制;溶解氧控制;（五）、 CO2的影响及其控制;2、 CO2浓度的控制;（六）、 补料的作用和控制;2、 补料控制系统 （1）、反馈控制系统 由传感器、控制器、驱动器组成。依据溶氧、pH、呼吸熵、排气中CO2分压，代谢产物浓度等指标直接控制。 （2）、非反馈控制系统 非反馈控制流加系统是不通过固定的反馈控制参数，而通过经验或数学最大优化模型法，得到最优流加操作曲线，从而实现流加控制。;（六）、 泡沫的影响及其控制;2．泡沫控制 （1）培养基与工艺调整。调整培养基的成分，少加或缓慢加易起泡的原材料；改变某些物理化学参数，如pH，升高温度，减少通气和降低搅拌速率；改变发酵工艺，如采用分次投料。 （2）菌种选育。筛选出不产生流态泡沫的菌种。 （3）机械消沫（mechanical defoaming ） 。利用机械强烈振动或压力变化而使泡沫破裂。 （4）化学消沫。加入消沫剂(defoaming agent) ，降低泡沫的液膜强度和表面黏度，使泡沫破裂。常用的消沫剂有天然油脂类(lipid)、高碳醇脂肪酸(high alcohol fatty acid)和酯类(ester)、聚醚类(polyether)、硅酮类(silicone)。;（七）、发酵终点的判断;影响发酵终点判断的因素：;三、 灭菌操作技术;（一）、 常用灭菌方法与原理;2、 辐射灭菌;3、干热灭菌;（4）湿热灭菌 ;5、培养基的过滤除菌 有些培养基成分受热容易分解破坏，不能使用蒸汽灭菌，常常采用过滤器除菌。 常见的有蔡氏细菌过滤器、烧结玻璃细菌过滤器和纤维素微孔过滤器等。 ;（二）、 无菌检查与杂菌控制;2、发酵污染杂菌的原因 ;第三节 发酵工程生产药物; 细菌抗菌素：多粘菌素，短杆菌素等 植物抗生素：蒜素，番茄素，黄连素C等 动物抗生素：溶菌酶，鱼素等。; 1928年，英国细菌学家Fleming在培养葡萄球菌时，发现污染在培养皿上的一株霉菌，能杀死周围的葡萄球菌。将此霉菌分离后得到的纯菌株，经鉴定为点青霉(Penicillium notatum)，将该菌产生的抗生物质命名为青霉素。; 1940年，Flor