第一章 酶工程绪论.pptVIP

* * * * * * * * * * * * 酶促反应的速度曲线及其说明 　引起酶促反应速度增加或下降的原因很多，例如：底物浓度下降、产物对酶的抑制、由于产物浓度增加而加速了逆反应、酶变性等。因此，为了排除上述干扰，酶活力应该用酶促反应的初速度来表示。 反应初速度 底物开始反应之后，很短一段时间内的反应速度。反应时间一般采用5-10min。 只要测定方法足够灵敏准确，原则上，反应时间越短越好。 二、酶活力单位 酶单位：在一定条件下，一定时间内将一定量的底物转化为产物所需的酶量。酶含量用每克酶制剂或与每毫升酶制剂含多少酶单位来表示（U/g或U/m1）。 国际单位 IU：在25℃、最适pH、饱和底物浓度的反应条件下， 每分钟内催化1微摩尔（μmol）底物转化为产物所需的酶量为1个酶活力单位，即IU=1μmol /min。 Kat单位：在最适条件下，每秒钟能催化l摩尔（mol）底物转化为产物所需的酶量，1Kat=1mol/s。 Kat与IU的换算关系如下： 1Kat=60×106IU 酶的比活力 每毫克酶蛋白（酶制剂）所含的酶活力单位数称为酶的比活力（specific activity） ，用 U／mg 蛋白表示。 酶的比活力是酶制剂的一个纯度指标。对同一种酶来说，比活力越高，表明酶纯度越高。 三、酶活力的测定方法 化学测定法 光学测定法 气体测定法 1.国内外酶制剂生产和应用现状 世界三大酶制剂公司 Novo Nordisk （丹麦） Genencor International(美国） Cuitor(芬兰） 三大公司销售额占世界总额的70% 国内外酶制剂工业概况 国际市场酶制剂销售额比例 2001年工业酶制剂的世界市场约为16亿美元 用于制药工业与精细化学工业约1.2亿~1.5亿美元 全世界已发现的酶有4000多种 目前工业上生产的酶有60多种 真正达到工业规模的只有20多种 剂型和品种有60多个 2001年为16亿美元 每年约为7――8％的增长率发展 2008年销售额达到30亿美元 我国酶工业发展阶段 (1) 1965 无锡酶制剂厂（星达生物工程有限公司） 淀粉酶 (2) 1979 糖化酶 (3) 1990 碱性蛋白酶 (4) 1992 中性蛋白酶 (5) 1995 耐高温淀粉酶 (6) 1998 国外大公司纷纷入驻 1999年投产 (7) 2006 酶制剂进入了全新的发展阶段 （高档次、高活性、高质量、高水品） 国内酶制剂销售额比例 2.国内外酶制剂生产应用差异 (1)规模 国外多公司重组 国内重复建设、效益低 (3)开发重点 国外：大力研制、开发新酶种和新用途 国内：品种少、剂型少 (2)投入 国外：开发经费高达15%，甚至19%销售额 国内：研究、开发投入不足，占1%销售额 世界上酶生产厂商有70多家，其中较大的有25家,最大的8家酶制剂生产厂商是： （1）? Novo Nordisk （丹麦） （2）? Genencor International （美国） （3）? Cultor （芬兰） （4）? Gist Broccdes（荷兰） （5）? Solvay （比利时） （6）? Clr Hansen （丹麦） （7）? Rhone Ponlene （法国） （8）? Quest （荷兰） 3. 我国酶制剂产业存在的问题： （1）技术研究与开发滞后； （2）行业和企业规模小而分散； （3）市场调查能力弱； （4）产品结构不合理、技术含量低； （5）应用的深度与广度不够； （6）产品品级低等。 4.我国酶制剂工业的若干对策建议 (1)走集约化、规模化经营 (2)加大科研投入 (3)发展具有自己知识产权的新技术 (4)调整产品结构、大力开发新品种 思考题： 酶工程的概念？其主要研究内容和任务有哪些？ 什么是核酸酶类？其发现有何重要意义？ 3.P酶和R酶的分类和命名有何异同？ 4.简述酶活力单位的概念和酶活力的测定方法？ 5.试述酶工程的发展概况与前景？ ※2010/9/14 * * * * * * * * * * * * * * * * 生物酶工程主要研究内容 （1） 用基因工程技术大量生产酶（克隆酶） （2）用蛋白质工程技术定点改变酶结构基因（突变酶） （3）设计新的酶结构基因，生产自然界从未有过的性能 稳定、活性更高的新酶。 生物酶工程示意图 酶工程原理和基本过程 菌种 →扩大培养→ 发酵→ 发酵酶液 →