生物技术制 药-07第七章 酶工程制药课程设计.pptVIP

生物技术制 药-07第七章 酶工程制药课程设计.ppt

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生物技术制药-07;第一节 概述;二、酶工程简介;二、酶工程简介;二、酶的生产菌;第三节 酶和细胞的固定化;一、固定化酶的制备;2、固定化酶的特点:酶类可粗分为天然酶和修饰酶,固定化酶属于修饰酶,修饰酶类还包括经过化学修饰的酶和用分子生物学方法在分子水平上进行改良的酶等。固定化酶最大特点是既具有生物催化剂的功能,又具有固相催化剂的特性。固相酶还具有以下优点:①可多次使用,而且在多数情况下,酶的稳定性提高。如固定化的葡萄糖异构酶可以在60~65℃条件下连续使用超过1000h;②反应后,酶与底物和产物易于分开,产物中无残留酶,易于纯化,产品质量高;③反应条件易于控制,可实现转化反应的连续化和自动控制;④酶的利用效率高,单位酶催化的底物量增加,用酶量减少;⑤比水溶性酶更适合于多酶反应。;3、酶和细胞的固定化方法 酶的固定化就是通过载体将酶限制或固定于特定的空间位置,使酶变成不易随水流失即运动受到限制,而又能发挥催化作用的酶制剂。 由于酶的空间结构、活性位点等物理化学特性不同,因此并不是一种固定化技术就能普遍适用于每一种酶,所以要根据酶的应用目的和特性,来选择其固定化方法。 目前已建立的各种各样的固定化方法,按所用的载体和操作方法的差异,一般可分为载体结合法、包埋法及交联法3类,细胞固定化还有选择性热变性(热处理)方法。;酶和细胞的固定化方法;(1)载体结合法;(1)载体结合法;(1)载体结合法;共价结合法的优缺点;(2)交联法;交联法的优缺点;最常用的交联剂是戊二醛,它的二个醛基与酶分子的游离氨基反应形成schiff碱,彼此交联,其方式如下: —CH=N-酶-N=CH-(CH2)3-CH=N-酶=N=CH-;交联法;(3)包埋法;(4)选择性热变性法;4、酶和细胞的固定化载体;吸附载体,主要有物理吸附和离子吸附两种,物理吸附有无机物和有机物。 包埋载体,目前工业上用的包埋载体主要有卡拉胶、海藻胶等。 共价结合载体,有纤维素、Sephadex A200、琼脂、琼脂糖、苯胺多孔玻璃等。 交联法是通过双或多功能试剂进行固定化,因此不需要固定化载体。也可用与吸附法和包埋法相同的载体进行交联。;5、固定化酶的制备技术;(1)吸附法制备固定化酶技术;(2)包埋法制备固定化酶技术;① 界面沉降法;②界面聚合法;(3)交联法制备固定化酶技术;(4)共价结合法制备固定化酶技术;二、固定化细胞的制备;2、固定化细胞的特点;3、固定化细胞的制备技术;三、固定化方法与载体的选择依据;四、固定化酶的形状与性质;(1)颗粒状固定化酶 颗粒状固定化酶包括酶珠、酶块、酶片和酶粉等。 制备简单,颗粒比表面大,转化效率高,适用于各种类型的反应器。 (2)纤维状固定化酶 只适用于填充床反应器,已有多种酶膜被制备出来。 (3)管状固定化酶 已制备出糖化酶、转化酶和脲酶等酶管。;2、固定化酶的性质;(1)酶活力的变化;(2)酶稳定性的变化;(3)酶学特性的变化;五、固定化细胞的形状和性质;六、固定化酶活力的测定方法;第四节 固定化酶和固定化细胞的反应器;二、反应器的选择依据;第五节 酶工程在医药工业中的应用;第六节 酶工程研究的进展;;;;二、酶的人工模拟;三、有机相的酶反应;四、基因工程酶的构建

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