常用分子生物学技术（药学本科）2012.ppt

第六章 常用分子生物学技术;第一节 分子杂交技术;在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。;DNA变性曲线 AT区先解链 GC区后解链 阶梯式曲线;核酸分子杂交 (nucleic acid hybridization ) 在DNA复性过程中，如果把不同DNA单链分子放在同一溶液中，或把DNA与RNA放在一起，只要在DNA或RNA的单链分子之间有一定的碱基配对关系，就可以在不同的分子之间形成杂化双链(heteroduplex) 。;变性;;探针技术;一、Southern印迹;带有DNA片段的凝胶;;二、Northern 印迹;三、Western 印迹;三种 印迹比较;三种印迹技术的比较;四、原位杂交 (in situ hybridization);原位杂交;五、生物芯片chip;微型化;2、生物芯片使用步骤;基因芯片扫描结果;3、生物芯片分类;基因芯片概念：基因芯片，也叫DNA芯片，是将大量特定序列的DNA片段（分子探针）有序地固定在经过处理后的尼龙膜、玻璃片、硅片等支持物上 ，从而能快速、准确地对大量DNA分子序列进行测定和分析的一种类似电脑的芯片。 原理：利用碱基的互补配对原则（DNA分子杂交） 材料：分子探针，尼龙膜，玻璃片，硅片;可在基因组水平进行基因表达和发现研究、突变、序列测定等，已方泛应用于基因组研