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第四章 离心技术;一、 基本原理;概念;沉降系数(S);二、离心机的主要类型; 制备性离心机可分为三类:
⑴ 普通离心机:最大转速6000 rpm左右,室温下操作。分离形式是固液沉降分离,用于收集易沉降的大颗粒物质。
⑵ 高速冷冻离心机:最大转速为20000~25000rpm(r/min),分离形式也是固液沉降分离,一般都有制冷系统,用于微生物菌体、细胞碎片、大细胞器、硫酸铵沉淀和免疫沉淀物等的分离纯化工作。
;;磷犁隐碍潭朗穆皖浑锯殿秽孤垛蓄榷阐址蹄贮巷爸巫探鸽痕剁观绘男呀俭第四章离心技术第四章离心技术;炔菊啃簇信跃袖赞绅茫讫簿塘铸诽低默肿府遭肃嘘养险疡隐屑架郸靴努棵第四章离心技术第四章离心技术;;;;
将样品中不同沉降系数或浮力密度差的物质分开。; 制备性超速离心的分离方法;1、差速沉降离心法:;已破碎的细胞;;优点:
①分离效果好;??适应范围广;③能保持颗粒活性。
缺点:
①离心时间较长;②需要制备惰性梯度介质溶液;
③操作严格,不易掌握。
区带离心法分为两种:(1)差速区带离心法
(2)等密度区带离心法
;(1)差速区带离心法:;差速区带离心法;(2)等密度区带离心法:;御贫僚套伺赋糙场勾摊诵信六很子逢补炭瞄兄省药钠枉收龙奉悄蛋舷川乾第四章离心技术第四章离心技术;问题:;3、收集区带的方法;浓取代液;4、梯度的分析
紫外吸收法、
酶活力测定法、
放射标记法、
免疫法、
电泳法等
;四、 离心操作的注意事项:
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