脊髓损伤后中枢性疼痛与脊髓背角P2X4受体关系的实验分析-外科学(骨外)专业论文.docxVIP

福建医科大学 福建医科大学 2010 级研究生毕业论文 PAGE PAGE 10 脊髓损伤后中枢性疼痛与脊髓背角 P2X4 受体 关系的实验研究 中文摘要 目的：⑴采用 Allen’sWADE 法建立 SD 大鼠的 L1 脊髓损伤后中枢性疼痛模型； ⑵利用免疫组织化学染色法观察小胶质细胞的活性变化和 P2X4 受体表达，初步探 讨 P2X4 受体在脊髓损伤后中枢性疼痛的发生机制。 方法：⑴采用 Allen’sWADE 法建立 SD 大鼠的 L1 脊髓损伤模型，随机分成正 常对照组、假手术组、脊髓损伤组（SCI 组）。术后每日观察各组大鼠自发痛行为 学变化；测定手术当天和术后 1 天、3 天、7 天、14 天、21 天、28 天各组大鼠机 械性缩足反射阈值（PMWT）和热缩足潜伏期（PWTL）。根据大鼠脊髓损伤后中 枢性疼痛的情况，将 SCI 组大鼠重新分为无脊髓损伤后中枢性疼痛组（NCP 组） 和脊髓损伤后中枢性疼痛组（CP 组），为下一步实验打下基础；（2）应用免疫组 织化学法，观察各组大鼠脊髓背角小胶质细胞活性变化和 P2X4 受体阳性表达情 况。 结果：⑴WADE 法成功建立 L1 脊髓损伤大鼠模型：脊髓损伤后 SD 大鼠出现 的典型瘫痪症状；术后 24 小时 SCI 组大鼠 BBB 评分均为 0 分，术后 24h 脊髓 HE 染色表现脊髓损伤的组织学表现，表明大鼠 L1 脊髓损伤模型建立成功；（2）脊髓 损伤后中枢性疼痛大鼠模型的建立成功：术后 3 天开始，SCI 组有 8 只大鼠不同 时地出现自噬现象，即大鼠对损伤水平以下部位搔抓、舔咬，甚至自残等过度修 饰行为。正常对照组、假手术组以及 SCI 组另外 12 只大鼠没有出现上述自噬现象。 同时大鼠疼痛行为学检测发现 SCI 组有 12 只大鼠（包括上述出现自噬现象的 8 只 大鼠）PMWT 和 PWTL 均下降。（3）大鼠脊髓背角 P2X4 受体表达情况：正常对 照组几乎不表达、假手术组和 NCP 组少量表达、CP 组表达量较多。CP 组较 NCP 组增多有统计学意义( P 0.05)，CP 组较正常对照组和假手术组明显增多( P 0.01)； NCP 组与正常对照组和假手术组比较均无统计学意义( P＞0.05 )；正常对照组与假 手术组比较无显著性差异( P＞0.05 )。 结论：（1）Allen’s 的 WADE 法建立的 SCI 后中枢性疼痛大鼠模型成功率可， 有较好的临床相关性和可重复性；（2）小胶质细胞上 P2X4 受体的激活可能是导致 SCI 后中枢性疼痛发生的机制之一。 关键词：脊髓损伤，中枢性疼痛，P2X4 受体 Experiment study of relationship of P2X4 receptor in spinal dorsal horn and central pain after spinal cord injury Abstract Objectives:(1) L1 spinal cord injury SD rats model of central pain are established by the method of AllensWADE. (2)Observe the morphological changes of microglia and expression of P2X4 receptor by immunohistochemical staining, and preliminary study the role of the P2X4 receptor in the mechanism of central pain after spinal cord injury. Methods: L1 spinal cord injury SD rats model are established by the method of Allens WADE. All rats are randomly divided into normal control group, sham group, spinal cord injury group (SCI group): observed pontaneous pain after surgery everyday. 0 day,1 day, 3 days, 7 days, 14 days, 21 days, 28 days after surgery, detect paw mechanical withdrawal threshold (PMWT) and paw withdrawal thermal latency (PWTL)to all rats.