CASE基因治疗课稿.ppt

丝裂原激活的蛋白激酶途径（MAPK途径） 丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)可激活促细胞分裂素，介导有丝分裂信号向胞核传导，调控细胞生长。PTEN能抑制MAPK途径上游中的细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERK)、RAS的活化以及Shc的磷酸化，从而对ERK/MAPK信号途径起负调节作用，而且PTEN基因还能抑制MAPK激酶的磷酸化，阻滞细胞生长周期于G1期，抑制肿瘤细胞生长。Sukmi Kang-Park等研究表明，在HCC形成过程中，PTEN通过阻断PKC，MAPK以及MAPK激酶，最终降低IGF-II的表达。 p16 p16，又称MTS1(mulitiple tumor suppresser gene l)，在细胞周期调控中起负性调节作用，防止细胞过度增殖，是一种与凋亡相关的肿瘤抑癌基因。 HCC组织中存在p16基因的异常及p16蛋白的表达缺失，p16在HCC的致病机制中发挥重要作用。p16基因的异常包括基因突变、杂合性缺失和纯合性缺失、基因的高甲基化。 p16基因突变与HCC p16基因缺失与HCC p16甲基化与HCC 转甲状腺素蛋白（TTR） 在人原发性肝癌中, 转甲状腺素蛋白（TTR）基因转录严重受阻遏。 转甲状腺素蛋白又称为前白蛋白（prealbumin,PA）,维生素A转运蛋白，分子量大约为54kD，由4个相同的亚单位组成。 TTR主要由肝细胞合成。在肝实质受损伤的机型肝炎、慢迁肝炎等病人血清中TTR含量明显降低，肝损伤越严重，降低越明显。在肝实质损伤不明显的原发性肝癌病人血清中TTR含量也明显下降。 TTR的突变与中暑圣经系统的广泛淀粉样病变相关，TTR的突变与原发性肝癌相关，发现了在原发性肝癌中TTR低表达，但在正常肝中高表达。 实验课教学的主要目标是使我们了解医学微生物学主要的研究方法和手段，掌握基本技能和基本原理，树立牢固的无菌观念 原发性肝癌( P r i ma r y h e p a t i c c a r c i n o m a ， P HC ) 是常见的恶 性肿瘤之一。目前对 P H C主要治疗方法有手术治疗、 放疗、 化 疗以及综合治疗等， 然而治疗效果并不理想。随着分子生物学 和免疫学技术的发展， 基因治疗技术在肿瘤的治疗 中具有广阔 的前景。 肝癌的自杀基因（suicide gene）疗法，即药物敏感基因（drug sensitivity)疗法，分子化疗、病毒导向的酶解药物前体疗法（VDEPT）、基因导向的酶解药物前体疗法（GDEPT），是将病毒、细菌中特有的前药物转换酶基因——自杀基因导入到肿瘤细胞，自杀基因编码的特异性酶类将无毒的药物前体在肿瘤细胞内代谢成毒性产物达到杀伤肿瘤细胞的目的。 自杀基因治疗 自杀基因类型 单纯疱疹病毒—胸苷激酶基因（HSV—TK） 水痘带状疱疹病毒—胸苷激酶基因（VZV—TK) 大肠杆菌胞嘧啶脱氧酶基因（EC—CD） 单纯疱疹病毒—胸苷激酶基因（HSV—TK） 单纯疱疹病毒（herpes simplex virus）胸苷激酶（thymidine kinase）基因能特异性地将核苷类似物无环鸟苷（ACV）或丙氧鸟苷（GCV）单磷酸化，进而在肿瘤细胞内代谢成三磷酸GCV。这种高毒性的GCV是细胞DNA聚合酶的抑制子和DNA合成的终结子，使分裂的肿瘤细胞被杀伤。 HSV-TK ACV OPO3 磷酸化后的ACV 水痘带状疱疹病毒—胸苷激酶基因（VZV—TK) 水痘带状疱疹病毒（varicella zoster virus）胸苷激酶，可将无毒的甲基嘌呤阿拉伯核苷（araMP）代谢成DNA酶的抑制物腺阿拉伯三磷酸（araATP），从而杀伤肿瘤细胞。 大肠杆菌胞嘧啶脱氧酶基因（EC—CD） 可将抗真菌药物5-氟胞嘧啶（5-Fc）转化为高细胞毒性的化疗药物5-氟尿嘧啶（5-Fu） 此外，还有大肠杆菌脱氧胞苷激酶（deoxycitidine kinase） 基因，大肠杆菌鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（gunaine phosphoribosyl transferase)基因等。 escherishia coli cytosine deaminase 现状 其中研究最深入，应用最广泛的仍是HSV-TK/GCV系统，VZV-TK/araM系统，FC-CD/5-Fc系统。其中HSV-TK/GCV系统的抗肿瘤效能已在多种肿瘤的体外实验中得到确证。 自杀基因杀死肿瘤细胞的作用机制 1.直接杀伤作用 2.旁观者效应 3.诱导机体免疫 自杀基因的旁观者效