离子对色谱法的流动相-太玮色谱.PDF

色谱讲堂（二十） 离子对色谱法的流动相 广州太玮生物科技有限公司 市场·技术部 Marketing@ 02062807938 (2013年7月) 色谱讲堂（二十） 前 言 离子对色谱法：是将与待测组分离子带相反电荷的离 子加入到流动相中，与待测组分离子形成弱极性离子对， 所形成的离子对化合物在流动相中不易离解，形成中性分 子，增强其在非极性固定相中的保留，从而改善分离效果。 显著增强保留 改善峰形 色谱讲堂（二十） 适用化合物类型 适用离子对色谱法的条件： 1、在反相HPLC色谱柱不保留，或保留很差（保留因子k＜2 ） 2、化合物带有强离子官能团，如磺酸基、羧基、胺基、铵基 等。 3、化合物在反相体系流动相有足够的溶解度。 色谱讲堂（二十） 常用离子对试剂和适用化合物 离子对试剂 适用化合物 磺酸钠类：己烷磺酸钠、庚 带胺基、铵基大极性化合物 烷磺酸钠、辛烷磺酸钠等 季铵类：四丁基氢氧化铵、 磺酸基、 四丁基溴化铵等 羧酸基大极性化合物 色谱讲堂（二十） 开发离子对试剂色谱法两个关键要素： 1、离子对试剂浓度与样品浓度比例； 2、流动相的pH值和缓冲盐的浓度。 色谱讲堂（二十） 离子对试剂浓度与样品浓度比例 实验条件和方法： 仪器：Agilent 1200 四元梯度系统 色谱柱：JADE-PAK ODS 3um 50mm ×4.6mm色谱柱 流动相：甲醇：10mM己烷磺酸钠（pH 2.8缓冲盐）（35：65 ） 指标物：苯胺 检测波长：254nm 流速：1ml/min 色谱讲堂（二十） 试验结果1 样品浓度：0.12mg/ml 1.25mM 色谱讲堂（二十） 试验结果2 样品浓度：0.23mg 2.5mM 色谱讲堂（二十） 试验结果3 样品浓度：0.93mg/ml 10mM 色谱讲堂（二十） 试验结果4 样品浓度：1.86mg/ml 20mM