蜜柚木质素合成相关基因的克隆与表达研究-园艺学;果树学专业毕业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 独创性声明 本人声明，所呈交的学位（毕业）论文，是本人在指导教师的指导下独立完成的研究 成果，并且是自己撰写的。尽我所知，除了文中作了标注和致谢中已作了答谢的地方外， 论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果。与我一同对本研究做出贡献的同志，都在 论文中作了明确的说明并表示了谢意，如被查有侵犯他人知识产权的行为，由本人承担应 有的责任。 学位（毕业）论文作者亲笔签名： 日期： 论文使用授权的说明 本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位（毕业）论文的规定，即学校有权送 交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅; 学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采 用影印、缩印或其他复制手段保存论文。 保密，在 年后解密可适用本授权书。 □ 不保密，本论文属于不保密。 □ 学位（毕业）论文作者亲笔签名： 日期： 指导教师亲笔签名： 日期： 福建农林大学硕士论文目录 福建农林大学硕士论文 目录 目录 缩略词 I 摘要II Abstract IV 第一章 引言1 1 柚汁胞粒化的表现及发生的原因1 2 高等植物木质素研究进展2 2.1 高等植物木质素的组成与分布2 2.2 高等植物木质素生物合成代谢研究进展3 3 本研究的意义及主要内容8 第二章 木质素合成途径相关基因的克隆与分析9 1 材料与方法9 1.1 材料9 1.2 试剂9 1.3 耗材与仪器设备9 1.4 菌株和克隆载体9 1.5 引物合成与测序9 2 试验方法9 2.1 柚汁胞和叶片总 RNA 提取 9 2.2 RNA 的检测与 cDNA 的合成 10 2.3 引物设计10 2.4 木质素生物合成相关基因的克隆12 2.5 柚木质素生物合成基因序列生物信息学分析14 3 结果与分析14 3.1 汁胞和叶片总 RNA 的提取及其质量检测 14 3.2 cmPAL 基因的克隆 15 3.3 cmPAL 基因的生物信息学分析 19 3.4 cmC4H 基因的克隆 20 3.5 cmC4H 基因的生物信息学分析 23 3.6 cm4CL 基因的克隆 25 3.7 cm4CL 基因的生物信息学分析 29 3.8 cmHCT 基因的克隆 30 3.9 cmHCT 基因的生物信息学分析 32 3.10 cmC3H 基因的克隆 34 3.11 cmC3H 基因的生物信息学分析 36 cmCCoAOMT 基因的克隆 38 cmCCoAOMT 基因的生物信息学分析 41 cmCCR 基因的克隆 43 3.15 cmCCR 基因的生物信息学分析 45 3.16 cmF5H 基因的克隆 47 3.17 cmF5H 基因的生物信息学分析 49 3.18 cmCOMT 基因的保守区克隆与分析 50 3.19 cmCOMT 基因的生物信息学分析 51 3.20 cmCAD 基因的克隆 53 3.21 cmCAD 基因的生物信息学分析 56 4 讨论58 4.1 柚汁胞木质素生物合成相关基因的克隆58 4.2 柚汁胞木质素生物合成相关基因的亚细胞定位62 第三章 柚果实发育过程中木质素基因的表达研究63 1 试验材料63 1.1 植物材料63 1.2 试剂与仪器63 2 试验方法63 2.1 木质素基因实时荧光定量 PCR 引物的设计与合成 63 2.2 柚总 RNA 的提取及其质量鉴定 63 2.3 cDNA 的合成 63 2.4 实时荧光定量 PCR 64 3 结果与分析64 3.1 总 RNA 质量 64 3.2 木质素基因实时荧光定量 PCR 内参基因与目的基因的参数分析 65 3.3 柚果实不同发育时期木质素相关基因的表达研究67 4 讨论71 第四章 总 结75 参考文献 77 附录 83 万方数据 万方数据 福建农林大学硕士论文 缩写词 缩略词 英文缩写 4CL 英文名称 4-Coumarate: CoAIigase 中文缩写 4-香豆酰 CoA 连接酶 Amp AP AUAP bp C3H C4H CAD CCoAOMT cDNA Cef COMT d ddH2O dNTP F5H GUS h HCT Hyg Kan LB min mL MS ampicilin adapter primer abridged universal amplification primer base pair p-coumarate 3-hydroxylase Cinnamate4-hydroxylase coniferaldehyde dehydrogenase Caffeoyl-CoA O-methyltransferase complementary DNA Cephamycin Caffe