分子遗传学 第二章.ppt

2.5.5. 跳跃基因 （Jumping gene / Transposable element） 转座子 是染色体上的一段DNA序列，它作为一个可以分离但不交换的单元，能从一个位点转移到另一个位点。 两端具有重复序列，中间有转位酶基因等序列；转位通过转座子两端的DNA序列和宿主DNA的一段序列发生重组而实现的。 转座子复制或不复制。 生物突变的主要来源。 1947 Barbara McClintock CSH 玉米糊粉层花斑不稳定现象伴随的遗传事件 发现玉米粒上有色素变化与染色体的断裂有关 1952提出可移动的控制因子（mobile controlling elements）假说。这些控制因子可以沿染色体移动，甚至在不同染色体间跳跃。 由于控制因子的转位，可使被控制基因（如玉米的红色素基因）的表达发生改变。 转座子类别 自主因子（autonomous elements）：带有一对终端IR序列和一个转座酶基因的DNA转座子，具备了催化自身转化的所有条件。 非自主因子（non-autonomous elements）：仅有IR。 后者是前者缺失所造成，这种缺失导致转座酶的（transposase）缺乏。 DNA转座现象的一般遗传特点 a) 不依赖 Donor site 与 Target site 间序列的同源性 (非同源重组过程 ，不依赖 recA 酶) b) 转座插入的靶位点并非完全随机（插入专一型） Hotspots (热点):Tn10, GCTNAGC; Tn 9, AT Regional preference ( 在±3kb区域内的随机插入) c) 某些转座因子（Tn3）对同类转座因子的插入具有 排他性（免疫性） d) 靶序列在转座因子两侧会形成正向重复（3-12nt）:3,5,9,11nt e) 转座因子的切除与转座将产生复杂的遗传学效应 遗传学效应 1)插入位点附近DNA发生缺失，比自发缺失发生频率高10.2-10.3倍，从第一nt开始； 2）打开临近的沉默基因； 3）极性效应：插入操纵子，使插入的结构基因功能遭受破坏，还使下游基因的功能发生障碍。 Transposition Inversion / Translocation l? 特定的基因片段 断点随机的任意DNA片段 可能破坏某结构基因 l? U.V / 诱变剂无效 U.V / 诱变剂可提高频率 l? 高频率的回复突变 不能产生回复突变 形成 mutable gene l?? 转座需 transposase Rec.A, B, D inverted repeat (IR) χ(chi) site, l? 与复制有关的过程 DNA链的断裂与错接的过程 f) 与倒位 / 易位染色体结构变异现象的区别 剪贴式转座因子（cut - paste ） 反转录转座子（Retro-transposon ） 类似反转录病毒 复制转位 真核生物的转座因子的种类 剪贴转位 可以直接从染色体的一个位点转移到另一个位点。 特点：两端有约20nt的IR，特异的转位酶附着于此而使转座子切离下来，整合到另一个染色体上。 切离后留下的缺口被衔接，序列变动而产生突变。Tn5, Tn7, Tn10. 反转录转位 酵母的Ty1因子（Ty1 element）。 1）转录成5,000 nt的RNA； 2）该转录本编码反转录酶，合成双链DNA； 3）通过整合酶（integrase）整合到染色体。 整个过程与反转录病毒的早期感染非常相似。 复制转位 转座子不切离，而是在两端交错地产生2个nick; 在接受点上也产生距离接近的2个nick； 4个断头发生交互重组（reciprocal recombination）连接起来，作为合成DNA的模板； 结果：转座子把自己的拷贝转位，自己仍在原位。 可转座的因子约占高等真核生物基因组的10%。 果蝇自发突变中，一半以上是由于转座子插入而导致。 2.5.5.5 转 座 的 遗 传 效 应 诱变效应 （提高重组频率、形成易变基因…） 切除效应 (倒位、缺