四种药物对斑马鱼急性毒性试验.doc

四 种 药 物 对 斑 马 鱼 急 性 毒 四 种 药 物 对 斑 马 鱼 急 性 毒 性 试 验 胡秀彩 1，2，边延峰 3，周 捷 1，吕爱军 1 （1.徐州师范大学生命科学学院，江苏 徐州 221116；2.江苏省药用植物生物技术重点实验室，江苏 徐州 221116； 3.天津生机集团股份有限公司，天津 300384） 摘 要：为探究消毒液和农药对斑马鱼的毒性与安全评价，首次选用高锰酸钾、甲醛、精碘和卡螨死四种试剂进行急性毒 性试验，以 24~96 h 半致死浓度（LC50）判断斑马鱼对四种药物的敏感性。结果表明，24、48、72、96 h 的 LC50，高锰酸钾分别为 1.15、1.12、1.12、1.11 mg/L；甲醛为 48、45、45、40 mg/L；精碘分别为 7.8×10-3、5.8×10-3、5.6×10-3、5.3×10-3mg/L；卡螨死分别为 1.95× 10-7、1.23×10-7、0.65×10-7、0.62×10-7mg/L。高锰酸钾、甲醛、精碘和卡螨死的安全质量浓度（SC）分别为 1.07、11.8、0.96×10-3 和 1.48×10-6 mg/L。参照我国化学物质对鱼类毒性分级标准，判定高锰酸钾对斑马鱼急性毒性为Ⅱ级，甲醛为Ⅲ级，精碘和卡螨死 对斑马鱼急性毒性为Ⅰ级。 关键词：斑马鱼；急性毒性；半致死浓度；安全质量浓度 中图分类号：Q176 文献标识码：A 文章编号：1004-2091（2012）01-0043-05 斑马鱼（Brachydanio rerio）作为一种模式生物， 除了具有经济、观赏价值外，目前已成为研究脊椎 动物胚胎发育及对外界环境变化，如紫外线、重金 属盐类、农药、消毒液、工业污水、放射性物质等对 人类影响的良好研究材料，是一种极好的实验模式 鱼[1]。 高锰酸钾是一种外用消毒药物，通过强氧化性 和吸附作用杀虫，也可以杀死细菌，常用于杀灭不 形成孢囊的原虫、蠕虫、三代虫等，也可用于消毒、 防腐、防治细菌性疾病[2]。甲醛是日益受到重视的环 境污染物之一，在工业上主要用于制造塑料、树脂、 橡胶等，在农林畜牧业、生物学和医药中普遍用作 消毒、防腐和熏蒸剂[3]。 近年来，化学农药的大量施用对生态系统造成 了严重影响。我国目前农药年产量达 80 万吨，居世 界第 2 位，精碘和卡螨死是常用农药之一[4，5]。这些 农药被大量施入土壤中，经过地表和地下径流会污 染饮用水和地表水源水，导致饮水污染事故的发 生，造成大量的经济损失，给人们的生产生活带来 了不便。斑马鱼的急性毒性试验是一种较好的判断 水毒性的方法，已被应用于废水和化学药品的毒性 测试[6]。 目前，国内关于鱼类急性毒性的实验研究，常 以鲤、金鱼等作为实验对象[1-6]。斑马鱼急性毒性试 验作为检测工业污染及水体污染的重要手段之一， 还未广泛采用[7]。本实验首次采用高锰酸钾、甲醛、 农药精碘和卡螨死四种试剂对斑马鱼进行急性毒 性试验，以便为水产养殖、鱼病防治等提供一定的 科学参考。 材料与方法 1 1.1 材料 高锰酸钾（分析纯）购自徐州试剂总厂；甲醛购 自徐州试剂二厂；精碘（有效成分 5%）购自广西金 穗农药有限公司；卡螨死（24.5%阿维柴）购自河南 欣农化工有限公司。实验室配制高锰酸钾浓度为 1.0 g/L，甲醛 120 mg/L，精碘 2.0×10-2 mg/L，卡螨死 储备液 1.3×10-3 mg/L，稀释至所需浓度，现用现配。 斑马鱼购于徐州市某花鸟市场，斑马鱼平均体 长 2～3 cm，平均体重 0.15 g，试验前在室内驯养 5 d 以上，自然死亡率小于 0.5%，试验前 1 d 停止喂食， 试验期间也不喂食。 1.2 方法 参照吕爱军等[7]实验方法进行。试验开始时连 续观察 8 h，观察记录鱼的中毒情况（平衡、游动、呼 吸、体色变化）以及 24～96 h 的死亡情况及开始死亡 时间及死亡数目。当鱼死亡时，立刻取出，观察并记 录其体表特征和内脏表面特征。实验时间为 96 h， 96 h 后若仍有存活鱼，继续实验至 7 d。 资助项目：国家自然科学基金资助项目；江苏省高校“青蓝工程”项目（2008） 作者简介：胡秀彩（1976- ），女，实验师，从事资源微生物学研究.E-mail: 通讯作者：吕爱军，副教授 HYPERLINK mailto:lajand@126.com .E-mail:lajand@126.com 实验数据分析采用 Bliss 法计算斑马鱼的半致死浓度 LC50 实验数据分析采用 Bliss 法计算斑马鱼的半致 死浓度 LC50，安全质量浓度用公式：SC=48 h LC50× 0.3（/ 24 h LC50/48 h LC50）2。 无明显体色变