高考生物二轮复习无菌操作技术实践名师公开课市级获奖课件（江苏专用）.pptxVIP

;知识系统构建;;基础;;6.统计菌落数目的方法可分为活菌计数法和显微镜直接计数法。前者的原理是涂布平板法接种，一个菌落代表一个单细胞；后者的原理是利用血球计数板，在显微镜下计数。;;;②涂布平板法：该法用在将细胞接种到培养基之前，通过液体稀释的方法分散细胞，最常用的液体稀释方法为10倍系列稀释，随着稀释程度的增大，单位体积中的微生物细胞数量减少，细胞得以分散。然后，将灭完菌冷却到45～50 ℃的培养基倒入无菌培养皿中冷却形成平板，然后选择细胞得以分散的合适稀释度的菌悬液加到平板中央，以玻璃涂布器将之均匀地涂布于整个平板上培养即可。;2.无菌操作要求 (1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。 (2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 (3)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附??进行。 (4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。;例1　某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如图所示，请分析回答下列问题：;解析　欲筛选可降解有机物A的微生物，需配制只以有机物A为唯一碳源的选择培养基，以保障目的菌的生长，抑制非目的菌的生长繁殖；若需“振荡”培养，表明该目的菌为好氧型菌；平板划线接种的工具为接种环，使用前后均需灼烧灭菌。;(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的_________。实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是___________。 (3)在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是______________ _____。 (4)转为固体培养基时，常采用平板划线法进行接种，此过程中所用的接种工具是_______，操作时采用_____灭菌的方法。 (5)如何确认培养基是否合格？ ________________________________________________________________________________。;;3.表达的条件：由于基因的选择性表达，细胞的全能性在植株上受到限制不能表达，只有在离体条件下，在营养、激素和其他条件适宜的情况下，细胞才能表达其全能性。动物细胞难以表达其全能性，但是通过核移植后，细胞核仍可表达其全能性。 4.表达的难易程度：植物细胞全能性易表达，而动物细胞的全能性不易表达，但动物细胞核的全能性可以表达。在所有细胞中，受精卵可直接发育为个体，有的生殖细胞也可在一定条件下表达其全能性。 5.意义：细胞全能性是植物组织培养和体细胞杂交的理论基础，也是现代动物体细胞克隆技术的理论基础。;;;2.植物组织培养中不使用天然激素的原因：组织培养时不用天然激素而是用人工合成的植物生长调节剂，是因为植物中存在相应的分解天然激素的酶而没有分解相应的人工合成的植物生长调节剂的酶，所以天然激素在植物体内作用和存在的时间短，人工合成的植物生长调节剂的作用和存在的时间长，作用效果明显。 3.天竺葵组织培养中愈伤组织形成及生根、生芽期间均需在15～25 ℃光照强度为1 000～2 000 lx的条件下，每天光照12 h进行培养。;4.无菌技术是植物组织培养成功的关键：植物组织培养不同于扦插、压条等常规的无性繁殖。由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，所以对培养条件的要求较高，对无菌操作的要求非常严格。若不小心引起污染，将可能造成培养工作前功尽弃，因此实验过程始终贯穿着灭菌消毒。对培养材料表面进行灭菌时，一方面要考虑药剂的消毒效果；另一方面还要考虑植物材料的耐受能力。不同药剂、不同植物材料，甚至不同器官都要区别对待。;例3　1958年，美国科学家将胡萝卜韧皮部的细胞 培养产生完整植株，如右图所示，请回答下列问题： (1)科学家所用的胡萝卜韧皮部细胞，在正常生物体内 _____(填“能”或“不能”)进行有丝分裂，原因是 ___________________________________。;解析　植物细胞之所以能保持全能性，是由于这些细胞均来自同一受精卵细胞的有丝分裂，具有发育成完整个体所必需的全部基因。;;解析　青霉素可以抑制细菌和放线菌，在添加青霉素的选择培养基上可以筛选分离真菌；在缺乏氮源的培养基上可以筛选分离固氮微生物；加入10%NaCl溶液的培养基可以筛选分离金黄色葡萄球菌，C项正确。;A.该实验采用的是固体平板培养基 B.该实验采用涂布平板法接种 C.Ⅰ和Ⅱ对照，说明大肠杆菌的生长不需要生长因子 D.Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要糖类;解析　培养基中添加了琼脂且能观察到菌落，因此本实验采用的是固体平板培养基，A项正确； 对大肠杆菌进行菌落计数