抗磺胺嘧啶及磺胺类药母核结构单克隆抗体的制备与鉴定-预防兽医学专业毕业论文.docxVIP

华中农业大学2005年硕|：研究生毕业论文摘要 华中农业大学2005年硕|：研究生毕业论文 摘要 为了实现对磺胺类药(SAs)多残留和磺胺嘧啶(SD)单残留的免疫分析，本研究先 后制备了抗磺胺类药母核结构(对氨基苯磺酰胺)和抗磺胺嘧啶的两种单克隆抗体， 研究结果如下： 1、用化学方法合成了半抗原N一磺胺一4一氨基苯甲酸(SDL)，该半抗原包含磺胺类 药的母核结构且以苯环为连接臂。采用混合酸酐法将SDL与人血清白蛋白(HSA)连接 制备了免疫抗原SDL—HSA，用同样的方法将其与卵清白蛋白(OVA)连接制备了包被抗 原SDL—OV扎用SDL—HSA免疫BALB／cd、鼠，经融合筛选制备了7株单抗，其中SDL一4 株腹水产量最高，且其效价在1：1．28×106以上。经单抗分型试剂盒鉴定，其亚型为 IgG2b。间接竞争ELISA试验结果表明，其对多种商品化的磺胺药均有较强的识别能 力，针对磺胺间甲氧嘧啶(SMM)、磺胺对甲氧嘧啶(SMD)、SD、磺胺喹恶啉(SQX)及 磺胺二甲嘧啶(SM2)的50％抑制率(IC。)分别为：251．3、374．9、117．5、19．5和233．1 ng／mL。以上结果表明该单抗可用于SAs多残留的免疫分析。 2、用重氮化一偶联法将SD与HSA连接制备了免疫抗原SD—HSA，用同样的方法将其 与OVA连接制备了包被抗原sD—OVA，用过碘酸钠法将SD一0VA