驴精液保存技术研究-动物遗传育种与繁殖专业毕业论文.docxVIP

摘要精液保存包括精液的液态保存(常温保存和低温保存)和冷冻保存。本试验比较了几种液态保 摘要 精液保存包括精液的液态保存(常温保存和低温保存)和冷冻保存。本试验比较了几种液态保 存稀释液的保存效果：对于冷冻保存以解冻后精液活力、畸形率和顶体完整率为指标，筛选出了驴 冻精适宜的冷冻保存液配方，确定了较理想的冷冻保护剂及其最适浓度，讨论了适宜的冷冻方法和 解冻温度，研究结果如下： 1．在4种常温保存稀释液中葡萄糖一甘油～卵黄液和葡萄糖一卵黄液的保存效果较好。所保存精液 的存活时间都极显著高于(PO．01)其它两种液；同一时间的精子活力显著高于(PO．05)其它两种 液。 2．在4种低温保存稀释液中奶粉一葡萄糖～卵黄液和葡萄糖一卵黄液的保存效果较好，所保存精液 的存活时间极显著高于(PO．01)其它两种液。 3．乳糖一葡萄糖一甘油一卵黄液作为冷冻保存液的保存效果较好，冻后精液活力、畸形率和顶体完 整率极显好于(PO．01)其它4种冷冻保存液。 4．细管冻精优于颗粒冻精。 5．冷冻细管精液时直接投入液氮法和液氨熏蒸法之间的冷冻效果差异不显著(PO．05)，但是 冷冻O．5mi细管时，液氮熏蒸法优于直接投入液氮法，差异显著(PO．05)。 6．在冷冻保存液中，保护剂浓度为5％的条件下，甘油的保护作用优于乙二醇和DMSO。 7．冷冻保护液中甘油的浓度为5％，且晟终浓度为2．5％时保存效果较好。冻后精液活力和顶体 完整率极显著高于(PO．01)其他含不同比例甘油的冷冻保护液。 8．40℃水浴解冻20s和75℃水浴解冻8s后精子活力差异不显著(PO．05)，但都明显优于25 ℃水浴解冻60s的解冻效果。75℃水浴解冻后精子的畸形率和解冻后精子存活时间较差，建议使用 40℃水浴解冻。 9．低速离心(1000rpm和15000rpm)优于高速离心(2000rpm和3000rpm)。解冻后精子活力和 顶体完整率差异显著(PO．05)。 lO．采用选出的最佳冷冻保存液、冷冻程序、解冻程序制备冷冻精液，并给7头发情母驴输精， 其中3头成功妊娠。 关键词：驴，精液冷冻，细管，人工授精 ABSTRACTSemen ABSTRACT Semen preservation includes liquid preservation(normal temperature preservation and low temperature preservation)and freezing preservation．The liquid preservation Can preserve semen in short time，make the semen activity not drop very quickly,is not the key that solves the semen preservation and the practice application，SO I does not do the key study in this experiment,has merely compared the preserved effect of several kind of liquid preservation dilution；As for the freezing preservation，in this study,semen motility,deformity rate and the acrosome integrity percentage of frozen-thawed spermatozoa were used to select the optimum freeing preservation dilution for donkey semen cryo-preservation，to determine the optimum glycerol concentration，and to discuss the effect of the method of freeing,the thawed temperature and additive cryo—preservation of donkey semen，and the results were asfoIlows： I·In 4 kind of normal temperature preservation diluent，the preserved effect of glucose．glycerine． yolk fluid and glucose。yolk fluid is better．The survival time of the semen is