抗氧化营养素干预对大学生抗氧化系统及DNA损伤的影响-营养与食品卫生学专业毕业论文.docxVIP

1前言抗氧化营养素干预对大学生抗氧化系统及 1前言 抗氧化营养素干预对大学生抗氧化系统及 DNA损伤的影响 1前言 DNA是遗传的主要物质基础，是生命中心法则(Central dogma)的决定 性物质。大量研究证明，DNA是辐射损伤和化学损伤的靶分子，许多化学和 物理因素，如紫外线、x射线、7射线和药物、农药及重金属盐等一些化学诱变 剂、致癌剂，都能使DNA受到损伤，使核苷酸序列发生改变，从而导致基因在 调节正常功能方面受到破坏。人类研究已经证明DNA损伤是诱变和癌症产 生的重要因素，并且氧化损伤被看成是发生肿瘤或引起慢性退行性疾病的第 一步‘”。正常情况下，机体可通过自身修复机制及时地将受损的DNA分子 修补，从而维持遗传物质的稳定性；但是当DNA分子受到严重损伤或反复遭 到损害时，机体细胞的自身修复系统就不能及时地加以修复，即使在添加脱氧 瞟呤和嘧啶核苷底物或补充核酸内切酶Ⅲ(切除修复的重要酶)的情况下，也 不能有效地促进DNA的修复[2]，并且随着年龄的增长，DNA的损伤和突变 增加，淋巴细胞清除由Hzoz介导的DNA损伤的能力下降[3]。由此可见研究 如何降低有害物质的危害和减少遗传物质DNA的损伤比研究促进DNA损 伤修复有重要意义。 维生素A，E，C，p胡萝h素、硒等是人体所需的重要营养素，其抗衰老、抗 氧化、抗肿瘤，增强机体免疫功能等作用已有定论“”]。近年来维生素的抗氧 化作用及与DNA氧化损伤关系的研究越来越引起关注，但多见于动物实验， 人体干预试验很少，尤其青年人群试验研究未见有报道。而青年时期的健康 对其老年时期癌症、慢性退行性疾病乃至衰老的发生有重要的影响。因此本 研究随机抽取100名大学生进行营养素补充试验，补充前了解抗氧化营养素 的摄入情况，干预后观察人体补充抗氧化营养素是否能提高机体的抗氧化能 力，是否能降低DNA的氧化损伤并能降低DNA损伤的代谢产物06‘甲基鸟 ·1‘ 2实验对象与方法嘌呤，为人类能减少和预防慢性退行性疾病和癌症的发生提供一定的指导意 2实验对象与方法 嘌呤，为人类能减少和预防慢性退行性疾病和癌症的发生提供一定的指导意 义。 2实验对象与方法 2．1人群选定 选择青岛大学医学院2000级入校体检健康的两个班大学生，排除心脏 病、肝炎、糖尿病等疾病，随机分为试验组和对照组。试验组为52人，男女各 为26人，平均年龄为18．63岁，对照组为53人，男生为25人、女生为28人， 平均年龄为18．68岁。试验组每人每天服用含维生素A3000IU，p一胡萝h素 1．5mg，维生素C800mg，维生素E200mg和亚硒酸钠400肛g的复合营养素片， 而对照组服用相同包装的、但不含有以上营养素的安慰剂，实验期为8周。 2．2营养状况调查 在实验开始前1周和实验结束前1周采用24小膳食回顾法‘83调查实验 对象各类食物及各种营养素的摄人量，了解我院大学生的膳食营养状况；同时 测定身高、体重及血红蛋白，了解我院大学生的发育状况。按《食物成分表》Ⅲ 通过营养统计软件计算每日各种营养素摄入量。评价标准按中国居民膳食营 养素参考摄入量‘”3(2001年1月)，1992年相比为：1992年全国营养调查‘“]， 大学生以中等体力劳动计。 2．3血样的采集 实验前后分别于清晨6：30抽取空腹静脉血6ml左右加入10毫升肝素抗 凝的玻璃试管，立即混匀后，取20微升用于血红蛋白的测定、120微升用于 DNA损伤分析，然后，剩余血3000转／分钟离心10分钟，取上层无溶血的血 浆置于5ml带盖无锌塑料离心管中，--20℃冰箱备用，一周内测定。 2．4实验材料及方法 2．4．1血红蛋白 氰化高铁法。试剂盒由天津中山研究所提供。 ·9‘ 2实验对象与方法2．4．2维生素A(VA) 2实验对象与方法 2．4．2维生素A(VA) 荧光分光光度法。仪器为Shimadzu公司生产的RF-540荧光分光光度 计。标准品由Sigma公司提供。取血浆0．5ml，加0．5ml的无水乙醇混匀去 除蛋白，再加2．5ml的环己烷萃取震荡混匀，离心2500rpm，5-6min，取上清液 在Ex346nm，Em478nm下进行荧光分析，根据公式计算出含量。 2．4．3维生素E(VE) 荧光分光光度法。仪器为Shimadzu公司生产的RF一540荧光分光光度 计。标准品由Sigma公司提供。取血浆0．5ml，加0．5ml的无水乙醇混匀去 除蛋白，再加2．5ml的环己烷萃取震荡混匀，离心2500rpm，5～6min，取上清 液在Ex299nm，Em328nm下进行荧光分析，根据公式计算出含量。 2．4．4维生素C(VC) 2，4一二硝基苯肼法。仪器为上海第三分析仪器厂生产的722分光光度 计。标准品由Sigma公司提供。取血浆150M加入600