黄芪对辐射所致小鼠损伤的保护作用-人体解剖与组织胚胎学专业毕业论文.docxVIP

郑州大学2005膳硕士学钕论文 郑州大学2005膳硕士学钕论文 黄苠对辐射所致小鼠损伤的保护作用 黄芪对辐射所致小鼠损伤的保护作用 硕士学位申请人 邹丹 推荐导师 张钦宪全宏勋 郑州大学医学院组织学与胚胎学教研室 河南郑州450052 摘要 研究目的 放射医学已成为治疗肿瘤的三大手段之一，但其生物效应给机体带来的损伤 也常严重地影响其正常作用的发挥。长期以来，人们曾试图寻找疗效可靠、价格 低廉的抗放疗药物，但均未奏效。近年来，中草药的药理作用研究已取得令人瞩 目的进展，尤其是补虚类药物对免疫、造血等功能的报道较多，但这些作用对辐 照后机体的保护作用及其机制报道尚少。因此，寻找防治放射病安全有效的中草 药无疑具有重要意义。黄芪为中医临床重要的补气药，具有固表止汗、补脾益气、 托毒排脓和利水等功效。现代医学证吩黄芪具有调节肝糖元，保护肝、脑的作用， 能促进机体体液免疫和细胞免疫，提高动物对缺氧的耐受性，还具有明显的抗衰 老和抗突变作用。本文研究了黄芪对辐射所致小鼠损伤的保护作用。 材料与方法 1黄芪对辐射小鼠的保护作用 1．1不同剂量黄芪对小鼠存活事的影响将实验动物随机分为7组(n-30)，每组 小鼠分别以每公斤体重Og、12．59、259、509、759、1008和1259黄芪水煎液灌胃。 30分钟后，以上动物均施8Gy60cot射线全身照射，观察其30天存活率。 1．2黄芪辐射前后给药对小鼠存活宰的影响98只小鼠，随机分为4组(正常对 郑州大学2005届硕士学位论文 郑州大学2005届硕士学位论文 黄芪对辐射所致小鼠损伤的保护作用 照缀、照射对照组、照前用药组和照后用药组)，缀60cot射线8GY致死量照射 (蠢兰常对照缱除羚)螽，躐察每缀30天存活哭数，诗算崮存活率、提离零、保护 系数。 2黄芪对骨髓嗜多染红细胞的徽棱率的影响除正常对照组外，其他3组小鼠均 经60C0叶射线照射，第7天取骨髓，涂片、染色，计算微核率。 3黄芪对巨蠢细胞吞t功能的影响 每组实验动物照射后5天腹腔注射批鸡红 细胞悬液lml，轻揉后吸出腹腔液lml，二氧化碳培养箱内孵育，固定、染色后， 计算吞噬率和吞噬指数。 4黄芪对造血系统的影响 4．1外周赢成熟血细胞各组小鼠于照射(6‘lcor 6Gy)后第6、12、18、24和30 天断尾取血，以氰化高铁血红蛋白光电比色法测lib，计算WBC和血小板的变化 率。 4．2骨奠有核细胞(B舵)各组于照射后第6天腹腔注射秋水仙素，5小时后取小 鼠右侧股骨，冲洗骨髓，制成单细胞悬液，计数每根股骨BMC总数和有丝分裂数。 4．3粒一单系造血祖细胞(c只H减) 4．3．1体外培养实验分3组进行：①正常对照组：取正常小鼠的BMC培养； ②照射对照组：取辐照后小鼠BMC培养；③照射用药组：取辐照后小鼠的BMC 培养，但培养体系内加入0．2ml黄芪水煎液。 4．3．2体内培养采用体内扩散盒技术，将扩散盒植入不同组别的小鼠腹腔内培 养。第6天脱臼处死小鼠，取出扩散盒。对扩散盒内培养物细胞集落计数。 4．4多能造血千细胞(CFU_S)将供体鼠处死后取其右侧股骨，冲洗骨髓，制成 BMC单细胞悬液，将该悬液经尾静脉输入经照射的受体小鼠，输注后第9天，计 数下列3组受体小鼠的脾集落数：①对照组，供体鼠和受体鼠均给生理盐水灌胃； ②供体给药组，供体鼠给黄芪水煎液灌胃，而受体鼠给生理盐水灌胃；③受体给 药组，供体鼠给生理盐水，受体鼠给黄芪水煎液。 5小鼠肝、脑、肾过氧化脂质(LPo)和超氧化物歧化酶(SOD) 5．1过氧化脂质(LP0)各组小鼠于辐照后第6天后脱臼处死，取其肝、脑、肾， 测光密度。 5．2超氧化物歧化酶(SOD)取不同组别小鼠的组织器官(肝、脑、肾)匀浆， 2 郑州大学2005届硕士学位论文 郑州大学2005届硕士学位论文 黄芪对辐射所致小鼠损伤的保护作用 比色法测怒邻苯三酚自氧化速率。 结果 1黄芪对辐射小鼠的保护作用 1．1不同剂量黄芪对小鼠存活率的影响 在12．5～759／kg的范围内，小鼠30天存活率随给药剂量的增加而提高；但继 续加大剂量至100和1259／kg时，小鼠30天存活率反而急剧下降。因此，759／Kg 为提高小鼠30天存活率的最佳剂量。 1．2黄芪辐照前后给药对小鼠存活率的影响 黄芪759／kg的剂量给药，无论是照前或照后用药组，其存活率均较照射对照 组有明显提高(PO．01)，保护系数均在1．20以上。表明黄芪具有良好的预防和 治疗放射损伤的效果。 2黄芪对骨髓嗜多染红细胞微核率的影响 黄芪(759／kg)可明显降低骨髓嗜多染红细胞的微核率(PO．01)，表明黄芪