黄芪多糖对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用研究-细胞生物学专业毕业论文.docxVIP

摘 要 缺血性脑血管疾病因其在临床上发病率、死亡率和致残率高而严重威胁着 人类的健康。局部脑缺血使部分组织血流下降，导致细胞功能及形态的破坏。目 前治疗方法主要是以溶解血栓，恢复缺血脑组织的血液灌流为主。虽然再灌注可 以使被阻塞的血管再通，恢复缺血脑组织的血流供应，但客观上又加重了脑组织 的功能障碍和结构损伤产生继发性损伤，形成脑缺血再灌注损伤。临床上利用溶 栓剂实现血管再通以及患者的自然再灌均可引起脑缺血再灌注损伤，因此研究和 探讨缺血再灌注损伤的机制，开发新的脑缺血疾病的预防和治疗药物，能够很好 地为人类健康事业做出贡献，也具有广阔的市场前景。 研究目的：通过建立局灶性脑缺血再灌注损伤模型，研究黄芪多糖对大鼠局 灶性脑缺血再灌注脑组织的保护作用，并对其机制进行探讨。 研究方法：1．确立局灶性脑缺血再灌注损伤模型的具体制作方法。选用体 重 250-300g SD 大鼠 40 只，随机分为假手术组 10 只、模型组 30 只，对模型组 大鼠进行神经行为学评分，计算手术死亡率和成功率。制作石蜡切片，进行 HE 染色，用于组织学观察，并从模型组中随机抽取 10 只大鼠与假手术组脑含水量 测定比较。 2．研究黄芪多糖对局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织含水量、SOD、MDA、 梗死体积的影响。SD 大鼠随机分 A、B 两大组，A 组用于测定脑组织含水量、 SOD、MDA，分假手术Ⅰ组，模型组，黄芪多糖低、中、高剂量组、黄芪注射 液对照组，每组 18 只；B 组用于测定梗死体积，分假手术Ⅱ组，模型组，黄芪 多糖低、中、高剂量组，每组 6 只。 3．利用免疫组化方法研究黄芪多糖对局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织 TNF-α 和 IL-1β 表达的影响。SD 大鼠随机分 5 组，假手术Ⅱ组、模型组、黄芪 低、中、高剂量组，每组 6 只。制作冰冻切片用于免疫组化实验和普通 HE 染色， 观察组织形态并计算平均积分光密度。 研究结果：1. 利用线栓法制作局灶性脑缺血再灌注损伤模型手术的成功率 大概在 80%，死亡率 10%，模型组的脑含水量与假手术组明显升高。2. 与假手 I II II 黄芪多糖对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用研究术Ⅰ组比较，模型组脑组织含水量及 MDA 含量显著升高，梗死率显著增大，SOD 值明显降低；与模型组比较，黄芪多糖各剂量组的脑含水量，MDA 含量显著降 低，SOD 值显著增高，梗死率也显著减小。中、高剂量组的作用效果好于黄芪 注射液对照组。3. 与假手术Ⅱ组相比，模型组的 TNF-α 和 IL-1β 表达量（平均 积分光密度值）明显增高；与模型组相比，黄芪多糖中、高剂量组的 TNF-α 和 IL-1β 表达量明显减少。从 HE 染色的细胞形态观察，黄芪多糖治疗组较模型组 尤其中、高剂量组细胞形态较模型组有明显的改观，核区更加清晰，肿胀减少。 黄芪多糖对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用研究 结论：1. 本实验室选用 SD 大鼠体重在 250-300g，鱼线直径 0.26mm， 360mg/kg 水合氯醛，颈总动脉进线并永久结扎颈总动脉和颈外动脉，可以获得 成功率较高，比较稳定的局灶性脑缺血再灌注损伤模型。2. 黄芪多糖可能通过 降低脑组织含水量、MDA 水平，升高 SOD 水平，减少梗死体积，对缺血再灌 注损伤的脑组织起一定的保护作用。3. 黄芪多糖对缺血再灌注脑损伤的保护作 用，可能与其减少脑缺血再灌注时期脑组织 TNF-α 和 IL-1β 的表达量有关。 关键词：黄芪多糖；脑缺血再灌注损伤；MDA；SOD；TNF-α；IL-1β III III ABSTRACT Ischemic cerebrovascular disease threatens humans health as its high rate of mortality death and disability. Focal cerebral ischemia can reduce the blood flow of focal cerebral tissue, which induces functional impairment and morphological destruction. Recently, thrombolysis therapy is the main method to recover the hemoperfusion of ischemic cerebral tissue. But, actually, the functional impairment and structural destruction are aggravated, then ischemia-reperfusion(I/R) injur