抗肝癌单链抗体的表达、纯化及其在荷人肝癌裸鼠体内的放射免疫显像的初步研究-影像医学与核医学专业毕业论文.docxVIP

50798彳猿错性赢甓 50798彳 猿错性赢甓 秉承学校严谨的学风与优良的科学道德，本人声明所呈交的论文是我个人 在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加 以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他^已经发表或撰写过的研究成果， 不包含本A或他人已申请学位或其他用途使用过的成果。与莪一同工作的同志 对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了致谢。 申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。 论姗吉签各：主垒塑遗一日期 儇护镌识产权赢嚼 本人完全了解第四军医大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在校攻读 学位期问论文工作的知识产权单位属第四军医大学。本人保证毕业离校后，发 表论文或使用论文工作成果时署各单位仍然为第四军医大学。学校有权保留送 交论文的夏印件，允许论文被查阅和借闻；学校可以公布论文的全部或部分内 容(保密内容除，})，可以采用影印、 缩印或其他复制手段保存论文。 论文作者签名：i左鱼丝弱 导师签名 学L吼一 第口军区土学J曩士学位论文英文缩写词表 第口军区土学J曩士学位论文 英文缩写词表 IPTG isopropylthi B—D-galactoside 异丙基硫化一B—D-半乳糖苷 EDTA ethylendiaminetetraeetate 乙二铵四乙酸 GST glutathione S-transferase 谷胱甘肽巯基转移酶 HCC hepatocellular care inoma 肝细胞肝癌 RII Radioimunoimaging 放射免疫显像 LB luria—bertani medium LB培养基 mSCFv mouse—derived scFv 鼠源性单链抗体 scFv single chain Fv 单链抗体 VH heave—chain variable region 重链可变区 VL l ight—chain v ariable region 轻链可变区 NBS N—Bromosuccinimide N_溴代琥珀酰亚胺 T／NT Target／non target 靶／非靶比 [Iodine] ”。碘 Single photon emission SPECT 。。“pu‘。。。d单光子发射计算机断层扫描仪 Tomography E．coli Escherichia Coli 大肠杆菌 Bp base pair 碱基对 kD。 kilodalton 千道尔顿 Ab antibody 抗体 第口军医土学硕士学位论文抗肝癌单链抗体的表达、纯化及其在荷人肝癌裸鼠 第口军医土学硕士学位论文 抗肝癌单链抗体的表达、纯化及其在荷人肝癌裸鼠 体内的放射免疫显像研究 硕士研究生 张歌萌 导 师 乔宏庆教授 刘彦仿教授 辅导教师 赵君博士 第四军医大学第一附属医院核医学科 摘 要 j肝癌是我国及某些亚非地区的最常见的恶性肿瘤之一，其中9雌以上是肝细胞肝 癌。肝细胞肝癌恶性度高，多数病人在发现时已是中晚期，目前仍缺乏有效的治疗措 施，攻克肝细胞肝癌己成为亟待解决的重大课露。早期发现和治疗对于患者的预后仍 起着关键性的作用。-产／，～ 肿瘤放射免疫显像(RII)是利用放射性核素标记肿瘤抗体，结合体外影像诊断肿 瘤的技术。其基础是标记抗体能够选择性地浓聚于肿瘤部位．以肿瘤／非肿瘤(T／NT) 比来定量的衡量这种亲肿瘤的特异性分布，近半世纪的动物实验及临床研究的结果证 明，放射免疫显像技术对于恶性肿瘤的定位及定性诊断有着其它手段所不能比拟的优 越性。通过对不同放射性核素的选择，使之成为临床恶性肿瘤诊断和治疗的有利的辅 助手段。但是到目前为止，对于肝肿瘤仍缺乏良好的示踪剂进行诊断。因此，临床迫 、 切需要一种特异性较高的肝癌阳性显像示踪剂，以利于早期病灶的检出。 I “／目的≥初步研究”1I标记的mscFv25在荷人肝癌裸鼠体内的生物学分布和放射免疫 ●_—-●-。___●●●_●一 显像．为肝癌抗原的单链抗体在肝癌的早期诊断和治疗的应用奠定基础。 厂2：方法 L 2．1 mscFv25的表达及纯化 2 弟口军医土学礓士学瘟论文将原核表达载体pGEX 弟口军医土学礓士学瘟论文 将原核表达载体pGEX 4T-mscFv25转化E．col i JMl09，通过IPTG的诱导表达目的 蛋白，此种融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的1270．表达产物经包涵体的纯化一变性一 复性一亲和柱纯化一凝血酶酶切一进一步纯化。 2．2”1I—mscFv25在荷瘤裸鼠体内的放射免疫显像的初步研究 将25只荷人肝癌裸鼠随机分为A、B两组．其中A组20只又分为Al、A2组，分 别通过静脉和腹腔注射相同剂量的”。I-mscFv25，B组5只为阴性对照。然后分别于注 射