抗鹅膏肽的全合成及其活性测定-生物化学与分子生物学专业毕业论文.docxVIP

中高称兑付钱式嗲 学位论文原创性声明 明441则 本人郑il!卢明 t 所旦交的论文是本人在导师的指导俨独立进行研究所取得的研究成果。 除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人 集体已经发表 撰 写的成果作品，也不包含为获得中南林业科技太学成其他教育机构的学位成证 H所使用 过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和 l集体，均已在文中以明确方式表明。本 人完全意识剑本卢明的法律后果由本人承担。 作者签名: 地 叫年 d 月/之日 中高称--付钱式等 学位论文版权使用授权书 本学校论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家 有关部门城机构递交论文的复印件成电子版，允许论文被1f阅或借阅。本人授权中南林 业科技大学可以将本学位论文的全部成部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影 印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本学位论文属于 z 1、 保密口，在年解密后适用本授权书。 2、 不保密田。 (请您在以上相应方框打 .J ) .\ 作者签名  :1月才赴 导师签名 2 平以飞 叫年们 12 日 叫年 b 月 Ilt日 瞅.1:学位 含义; 抗鹅膏肤的全合成 JC活性测定 摘要 抗鹅膏肤 (Antamananide) 是…种源自毒鹅膏 (Amanita phalloides) 的无毒环十 肤，其氨基酸残基组成为坏，卜 Phe-Pro- Pro-Phe -Phe-Val-Pro- Pro- Ala-Phe) ，它 是毒蘸肤和海伞毒素转运系统的竞争性抑制剂，因此对抗鹅膏肤进行研究具有重 要的意义。 本实验 j恿过多肤白动合成仪合成抗鹅膏肤直链前体后，采用手动合成抗鹅膏 肤，并对其进行制备、检测分析，对制备盾的抗鹅膏肤进行活性测定，其研究结 果如下: ( 1)本实验对抗鹅骨肤直链前体的合成采用的是 H本岛津 PSSM-8 型多肤白 动合成仪合成，在对其反应程序进行优化和改进后，其得率可达 93% 。抗鹅窗肤 直链前体的自动合成原理句回相人工合成原理相间，句回相人工合成相比自动合 成的优势有:安全，实验周期短，缩合率高，得率高等。并对抗鹅膏肤赢链前体 进行测序分析，代静质谱分析，提高了合成序列的可信度。 (2)对于抗鹅啻肤直链前体的环化方法，本实验分别采用了 DCC-HOBt 法， DPPA 法和 DMF 法，对抗鹅膏月大直链前体进行环化，并对环化结果进行分析比对， 得出 DPPA 法是其中最有效的环化方法，可获得纯度为 35.55% 的抗鹅膏肤。在对 抗鹅膏肤的制备分离纯化后，可得到纯度为 93.3% 的抗鹅膏肤样品。 (3) 本实验对抗鹅膏肤直链前体样品和抗鹅膏肤样品进行检测，通过紫外分 光光度计的波长扫描得 220nm 为两种样品的最佳检测波长:通过红外光谱分析得 到两种样品官能因骨架，各种键之间的伸缩振动和变形振动的异同，较为系统的 对两者的结构，性质进行了分析比对。 (4)在对抗鹅膏肤的活性测定部分，使用的是毒性比鹅窗肤较小的鬼笔坏肤， 其 LDs。在1.8-2.2mglkg ，在对小鼠进行肌肉注射鬼笔环肤毒素后36h ，对照组小 鼠死亡，而同时注射抗鹅酱肤样品的实验组小鼠的死亡时间推后了 12ho 关键词:抗鹅膏肤白动合成环化高效液相色谱纯化活性检测 明七学位论文 抗鹅膏肤的全合成Jti舌 f.j:测定 ABSTRACT Antamananide(anti amanita peptide，AA) is NonToxic cyclopeptide that was isolated from lipophilic part of extracts of Amanita phalloides by a series of chromatographic procedures. 丁he compose of amino acid is cyclo-( -Phe-Pro-Pro Phe-Phe-Val-Pro-Pro-Ala-Phe) .In the liver parenchyma cells，antamananide is in contrast to the toxic peptides of amanita.So the study of antamananide was of great significance. In this experiment through the automatic peptide synthesizer s