慢性应激对大鼠海马CA3区锥体细胞树突骨架的效应-精神病与精神卫生学专业毕业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 慢性应激对大鼠海马 CA3 区锥体细胞树突骨架的效应 2000 级研究生 金海燕 导 师 刘少文 主任医师 摘 要 背景与目的：慢性应激可诱发或加重诸如复发性抑郁症、创伤后 应激障碍（PTSD）等许多精神神经疾病。尽管这些疾病的发病机制 还不清楚，但普遍认为慢性应激引起的海马结构与功能的改变可能参 与其中。研究已经表明，慢性应激可引起大鼠海马 CA3 区锥体细胞 顶树突萎缩，且应激大鼠的行为与复发性抑郁症和 PTSD 患者的临床 表现极为相似。海马是司职学习、记忆、情绪反应及认知功能的重要 脑区，临床发现复发性抑郁症及 PTSD 患者的海马功能受损，慢性应 激引起的海马萎缩可能与上述疾病的发生发展密切相关。神经元的形 态结构需要完整的细胞骨架来维持，海马萎缩可能与其神经元细胞骨 架的改变有关。微管是树突骨架的重要成分，故微管破坏可能参与了 海马 CA3 区锥体细胞顶树突萎缩的机制。本研究观察了慢性应激大 鼠海马 CA3 区锥体细胞树突内微管的形态结构和微管相关蛋白 2 （MAP2）表达水平及[Ca2+]i 浓度变化，旨在探讨慢性应激引起海马 神经元树突萎缩的可能机制。 材料和方法：实验对象为 Sprague-Dawley （SD）雄性大鼠（2 月 龄），体重 180-250g。随机分为对照组、应激组。应激组大鼠每天接 受强迫游泳 20 分钟，共 4 周。Golgi 染色和计算机图像分析测定海马 CA3 区锥体细胞顶树突一级树突的直径及长度，常规透射电镜观察树 突超微结构特别是微管（microtubule）的改变。免疫组织化学方法和 计算机图像分析技术定量检测 MAP2 在海马 CA3 区锥体细胞的表达 水平。激光共聚焦显微镜 (LSCM) 方法测定海马 CA3 区锥体细胞 [Ca2+]i 的聚集情况。 结果：应激组大鼠海马 CA3 区锥体细胞顶树突一级树突长度 （125.35um±18.69um）较对照组（98.51um±17.48um）明显变短 （p0.01），直径（6.40um ± 0.94um）较对照组 (5.65um ± 0.85um) 也明显变粗（p0.05）；应激组大鼠海马 CA3 区锥体细胞树突内超微 结构发生改变，主要表现为：树突纵切面微管断裂，平行微管间距离 变宽；横切微管环不规则，单体分布不均匀；线粒体嵴模糊，偶可见 空泡样变性。 应激大鼠的海马 CA3 区锥体细胞磷酸化 MAP2 表达的平均灰度 值（145 ± 4.40）较对照组（149 ± 1.81）显著降低（p0.01）。由 于灰度值与表达强度成反比关系，即在慢性应激时，大鼠海马 CA3 区锥体细胞磷酸化 MAP2 的表达强度增加。应激组大鼠海马 CA3 区 磷酸化 MAP2 阳性表达的细胞数（40.36 ± 1.35）较对照组（42.73 ± 1.56）明显减少（p0.05）。 i应激组大鼠海马 CA3 区锥体细胞内 [Ca2 ＋ ] i  荧光强度像素值 （1548.83 ± 118.53）明显大于对照组（598.71 ± 48.）（p0.01）。 结论： 慢性应激可引起大鼠海马 CA3 区锥体细胞树突内微管解聚；慢性 应激可导致大鼠海马 CA3 区锥体细胞[Ca2+]i 聚积及磷酸化 MAP2 表 达增加。这些改变可能参与了慢性应激引起海马神经元顶树突萎缩的 机制。 关键词： 慢性应激； 海马； 一级树突； 微管； 微管相关蛋 白 2（MAP2）； Effects of chronic stress on cytoskeleton of pyramidal neurons in hippocampal CA3 subfield in rats Postgraduate Jin Haiyan Supervisor Pro.Liu Shaowen Abstract Background and objective: Exposure to chronic stress is known to precipitate or exacerbate many neuropsychiatric disorders such as depression and PTSD. Although the responsible brain sites in the pathogenesis of these disorders have been obscure, the hippocampus is thought to be involved. Indeed, chronic stress in rats induces atrophy of apical dendrites of the pyramidal neuro