课件：除胱氨酸酪氨酸外.ppt

（?4?）发酵法　 发酵法生产氨基酸是利用微生物具有的能够合成其自身所需的各种氨基酸能力，通过对菌株的诱变等处理，选育出各种缺陷型及抗性的变异菌株，以解除代谢节中的反馈与阻遏，达到以过量合成某种氨基酸为目的的一种氨基酸生产方法。（代谢产物均停留在该代谢产物之前的一步：目的氨基酸） ★ 初生氨基酸：微生物通过固氮作用、硝酸还原及自外界吸收氨使酮酸氨基化成相应的氨基酸，或微生物通过转氨酶作用，将一种氨基酸的氨基转移到另一种酮酸上，生成的新氨基酸也称为初生氨基酸。 ★ 次生氨基酸：在微生物作用下，以初生氨基酸为前体转化成的其它氨基酸。 大多数氨基酸均可通过以初生氨基酸为原料的微生物转化作用而产生。 第六节 个别氨基酸生产工艺 L-ASP L-Lys 一、固定化酶法生L-天冬氨酸 作用与用途 L-ASP：有助于鸟氨酸循环，促进氨和CO2 生成尿素，降低血中氨和CO2 ，增强肝功能，消除疲劳，用于治疗慢性肝炎，肝硬化及高血氨症，同时也是复合氨基酸输液的原料。 结构与性质 酸性氨基酸，呈白色菱形叶片状结晶，等电点为2.77，溶于水及盐酸，不溶于乙醇、乙醚，在25℃水中溶解度为80g/L(0．8％)，75℃时为288g/L(2．88％)，在碱性溶液中为左旋性，在酸性溶液中为右旋性。 原理 延胡索酸 * 固定化酶法生L-天冬氨酸工艺路线 粗结晶 脱色及重结晶 延胡索酸铵 固定床反应器 （40cm×200cm） 转化率95% 真空干燥 固定化天冬氨酸转氨酶（ AS1.881菌种发酵制备，明胶固定） 转化液 成品 ①菌种培养及E.coli的细胞：接种于摇瓶，37℃振摇培养24h，逐级扩大培养至1000一2000L规模。培养调pH为5.0，升温至45℃并保温lh，冷却至室温，转筒式高速离心机离心，收集菌体(含天冬氨酸酶)备用。 40℃的12%明胶溶液及10L1.0%戊二醛溶液，充分搅拌均匀，放置冷却凝固，于5℃过夜后，切成3-5毫米的立方小块，蒸馏水充分洗涤，滤干得含天冬氨酸酶的固定化E.coli，备用。 固定化酶法生L-天冬氨酸工艺流程叙述 ②生物反应器 将固定化E. coli装填于填充床式反应器（40cm×200cm）中，制成生物反应器。 特点：工艺简单、转化率高、副产物少、易提纯。 ④ 精制 取粗品用稀氨水溶解(pH5.0)成15％的溶液，加1％活性炭，70℃搅拌脱色1h，过滤，滤液于5℃结晶过夜，滤取结晶，85℃真空干燥，即得药用L-Asp成品。 ③转化、结晶 取保温37℃的1mol/L延胡索酸铵(含1mmolMgCl2，pH8．5)底物溶液，按一定空间速度(SV)连续流过生物反应器，收集转化液，过滤，滤液搅拌下用1MHCl调pH 2.8，5℃过夜，滤取结晶，用少量冷水洗涤，抽干，于105℃干燥即得L-Asp粗品。 注解 ①吴梧桐等，应用固定化酶工程技术生产L-Asp，年产量达1000吨，底物转化率＞99．56％。 日本应用固定化E.coli生物反应器连续化生产L-Asp获得成功。进而以K—卡拉胶取代聚丙烯酰胺固定化方法，提高了产率。京都川端教授等开发用念珠状的不溶性吡啶树脂固定天冬氨酸酶的大肠杆菌C—600活简体，可高效的生产L-Asp。此外，利用大肠杆菌的基因重组技术改良天冬氨酸酶高产菌获得成功，提高了产酶量2—3倍。 ②天冬氨酸酶的生物菌种改进。 L-天冬氨酸产品检验及技术评价 二、L-Lys的制备 性能特点： 赖氨酸是合成脑神经、生物细胞核蛋白及血红蛋白不可缺少的成份是动物自身不能合成、必须从食物中摄取的氨基酸之一，因食物中缺乏赖氨酸，所以又称之为 “第一缺乏氨基酸”。将赖氨酸添加到食品中可以提高蛋白质的利用率，从而大大强化食品的营养，是一种优良的食品强化剂。 用途： 1.用于饲料业 赖氨酸具有两个氨基，表现为碱性氨基酸并具有特殊的性质，在饲料中添加适当比例的赖氨酸可以改善饲料中氨基酸的平衡，提高饲料利用率，促进动物生长和改善肉质的功效。 2.用于食品工业 由于谷物中赖氨酸含量甚低，在加工过程中已被破坏而缺乏，故为第一限制性氨基酸，添加到食品中可以促进生长发育、添加食欲、减少疾病、增强体质的作用，用于罐头中还有防臭保鲜的作用。 3.用于医药工业 赖氨酸可用于配制复合氨基酸输液，它比水解蛋白输液效果好，副作用小。赖氨酸可与各种维生素、葡萄糖制成营养补剂，口服后易被肠胃吸收。赖氨酸还可以改善某些药物的性能，提高药效。 缺乏赖氨酸的症状包括疲劳，虚弱，恶心，呕吐，头晕，没有食欲，发育迟缓，贫血等。可以在医疗专业人员建议下采取赖氨酸营养补品。赖氨酸每日的建议摄入量是儿童每磅体重10毫克，成年人每天在3000-9000毫克之间。 已经证