课件：九发育毒性与致畸作用.ppt

广东药学院公共卫生学院卫生毒理学教研组 Chemical Teratogenesis Developmental Toxicology 体内初筛试验（C.K试验） 又名生殖／发育毒性筛选试验 依据：大多数出生前受到的损伤将在出生后表现为存活力下降和／或生长障碍。因此在仔鼠出生后，观察其外观畸形，胚胎致死，生长迟缓等发育毒性表现，而不进行传统常规试验中内脏和骨骼的检查，就可达到筛选的目的。 优点：所用动物少，检测终点少，实验周期短，能提供有关化学物对生殖和／或发育可能发生影响的初步信息。 广东药学院公共卫生学院卫生毒理学教研组 Chemical Teratogenesis Developmental Toxicology 发育神经毒性试验方法 发育神经毒性测定主要以啮齿类动物为实验对象，通过行为学、病理学指标来判断化学物质是否具有发育神经毒性。 广东药学院公共卫生学院卫生毒理学教研组 Chemical Teratogenesis Developmental Toxicology THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 先天无脑畸形男孩，存活了3年。 广东药学院公共卫生学院卫生毒理学教研组 Chemical Teratogenesis Developmental Toxicology 1. 研究目的 评价化学物对配子成熟、交配行为、生育力、胚胎 着床前和着床的影响(包括前述生殖发育过程 A 和 B 阶段的评价)。 雌性包括对动情期、输卵管运输、着床和胚胎着床前阶段发育的影 响。雄性包括检测对功能的影响(例如性欲、附睾的精子成熟等)。 2. 动物 至少一种，首选大鼠。每性别、每组的动物数应足以对 数据进行有意义的解释。建议每性别、每组16-20 窝。 3. 给药期 应说明交配前染毒时间的长度并提供依据。一般采取 雄性交配前四周开始重复染毒，直至交配成功。若要保证雌性受孕 成功，雄性也可继续染毒，仍同笼至处死。雌性交配前两周开始染 毒(可覆盖至少两个完整的动情期)直至着床。 4. 交配及受孕检查 雄大鼠给药4周，雌大鼠给药2周后开始同笼。 交配期 2-3 周，交配比例 1∶1。实验程序应能识别出各窝的 2 个亲本，以避免不正确结果的分析和解释。 广东药学院公共卫生学院卫生毒理学教研组 Chemical Teratogenesis Developmental Toxicology 一、生育力和早期胚胎发育毒性试验 ? 5.终末处死 雌性一般在孕中期第13-15天终止妊娠。雄性在证 实交配并受孕成功后处死检查。 ? 6.观察项目 染毒期间观察雌、雄亲代(Fo)体征和死亡(至少1 次／日)，体重和体重改变(至少2次／周)，摄食量(1次／周)，镜 检雌性阴道涂片(交配期间1次／天)和其他毒性研究中见到的靶效 应。 ? 处死时所有成体均作尸体解剖和肉眼观察，进行所有动物的睾丸、 附睾、卵巢和子宫的组织学检查，附睾或睾丸中的精子计数以及 精子存活力测定。检查计数雌性的黄体数，着床数，吸收胎，死胎 和活胎数。保存肉眼发现改变的脏器，以便进行可能的组织学评 价，并保存足够的对照组的相应脏器，以供比较。对明显未孕的 大鼠或小鼠(而不是对家兔)，可用硫化铵子宫染色鉴别胚胎着床前 死亡。 ? 7.结果评定 综合对F0代观察的各项指标和参数，用合适的统计 方法分析和评价。在分析对胎体(子一代，F1)的影响时，应考虑下 述参数：各组受影响的窝数比；每窝受影响的胎体的组平均百分 率；受影响胎体总数比。 广东药学院公共卫生学院卫生毒理学教研组 Chemical Teratogenesis Developmental Toxicology 二、胚体-胎体毒性试验(致畸试验) 1. 研究目的 评价母体自胚泡着床到硬腭闭合期间接触受试物对妊娠雌性和对胚体-胎体发育的有害影响，即前述生殖发育过程中的C和D阶段，主要包括增强了与非妊娠雌 性有关的毒性，胚体-胎体死亡、生长改变与结构异常。 2. 动物 通常用两种，一种是啮齿类，首选大鼠，另一种是非啮齿类， 最好是兔。若仅用一种动物，需提出正当理由。每组动物数应足以对数据 进行有意义的解释。建议每组 16-20 窝。雌性宜用性成熟的，未交配过的动物。 3. 给药期 从着床期到硬腭闭合，即器官形成期，大、小鼠孕期的第6～15 天，兔孕期的6～18天。 致畸试验除阴性对照外、应设阳性对照组。 阴性与阳性对照组的作用分别是为自发畸形的发生和该批实验动物在试验条件 下的敏感性提供资料 广东药学院公共卫生学院卫生毒理学教研组 Chemical Teratogenesis Developmental Toxicology 4. 终末处死与标本制作