酶法合成蔗糖尿病6酯的研究-生物化工专业毕业论文.docxVIP

摘要 摘要 11111111111111111111111111111111111111111111111111 摘要 Y1851943 庶糖币乙酸酶是合成越级甜味剂王氯煎糖的关键中间体。三氯庶糖具有甜度高、无 能盘、安全性强、稳定性高以及甜味纯正等优点，是一种极具竞争力的究荣甜味剂。在 庶糖酣合成工艺的研究中，生物催化合成法因其温和的反应条件和高度的区域选择性而 备受关注。本文研究了非水介质中以脂肪酶作为催化剂，催化瞅基供体与煎糖进行转醋 反应生成庶糖+乙酸酶的反应体系，并对产物煎糖 -6- 乙酸酶进行了分离与鉴定:初步 尝试了用酶，化学法合成三氯煎糖，并采用相似的催化体系合成煎糖冶幽月桂酸醋。 本文首先建立了一套用于鉴定煎糖牛乙酸醋的高效液相色谱分析方法，分析条件 为: HPLC(Agilent 1100 系列)，色谱柱 (Diamonsil C 18 5J.Ull 250x4.6m.m);蒸发光散射检 测器 (Alltech 公司);流动相为甲醇:水 (10:90 ，V/η，流速0.8 mL /m恤，柱温 3S.C ，进 样量 1 J!L。该检测方法能够有效分辨和定最分析庶糖-6-乙酸酶与照糖-4-乙酸酣等同分 异构体。 然后，对非水相脂肪酶催化合成庶糖牛乙酸醋的各因素条件进行了考察。通过对比 实验，发现以 DMSOI叔丁醇为反应介质，以固定化脂肪酶Li pozyme TLIM 为催化剂， 可以高效率的催化乙酸乙烯酣和庶糖进行转醋反应;对反应体系中各因素用盘和影响反 应的参数进行优化，得出: DMSO 与叔丁醇的体积比为 1:4，庶糖与毗基供体乙酸乙烯 醋的摩尔比为 1:10，Lipozyme TLIM 用最为1.0 即N/(mg憔糖)，转酣反应的最适温度、 转速、底物庶糖的浓度分别为: 30.C 、200 r/min ，0.06 m.moLlmL，反应 9h 胖、糖+乙酸 酷的产率达到 89.3%。 转酶反应结束后，通过离心、蒸发除去固体物质和低沸点液体，加入 3 倍体积工氯 甲炕，过滤得到的照糖牛乙酸酣粗品沉淀;经柱层析法纯化后庶糖而乙酸醋纯度达到 99.7%; 通过液质联用、红外光谱和核磁共振进行结构鉴定，确定反应产物为庶糖而帽乙 酸醋。 尝试了以庶糖为原料，先用酶法合成庶糖 -6-乙酸酶，再通过化学手段进行氯代和脱 乙毗基反应生成三氯煎糖，该酶嗣化学法合成立氯庶糖的总收率为 31.7%。 尝试使用酶法合成庶糖+乙酸醋的相似体系制备煎糖冶翩月桂酸醋。以 DMSOI叔，丁 醇为反应介质，在 30.C 、200 r/min 下，加入1.。而N/(mg燃糖)的Lipozyme TLIM 和 10 倍庶糖摩尔浓度的月桂酸乙烯脂，反应 9 h ，煎糖-6-月桂酸酣产率达到 97.1%。说明该 系统在酶法合成庶糖币，酣中有一定的适用性。 关键词:庶糖-6-乙酸酶三氯庶糖转酶反应非水介质脂肪酶瞰基供体产率庶 糖+月桂酸酶 Abstract Abstract Sucrose-6-acetate is the key intermediate when we synthesizing 伽 super-swee何时r sucra1Ose. Sucralose is a perfect and competitive sweetener as its high sweetness，耐nOg security，pOwe础11 stability，pure sweet as wellωnO energy. In the study Of the synthesis Of sucrOse esters，mOre research w:ωfocus on the biocatalyst synthesis because of its mild reaction cOndition and high regioselectivity. In 也is paper，syn由esis of sucrose-6acetate using lip脱 ωcata1yze acyl donor and sucrose in non叫ueous medium was s吃:udied. The product sucrose币-acetate w邸 separated and purified from the reaction cata1yzed with lip础e. Moreover，the synthesize sucralOse applying 由.e way of enzyme-chemíc a1 as well as synthesizing sucrose-6-1aurate using the s