课件:二蛋白质化学.ppt
* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 三、蛋白质含量的测定 1.凯氏定氮法 3.紫外吸收法:由于核酸在260nm具有光吸收,对测定干扰较大,可采用280nm、260nm同测法。 蛋白质浓度mg/mL=1.45A280-0.74A260 2.考马斯亮蓝法:考马斯亮蓝G250是一种带有负电荷的染料,在酸性条件下,与蛋白质上的正电荷结合,形成蓝色化合物,在595nm具有特定吸收。该反应简便、快速。 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 根据下面给出的信息,确定肽链中氨基酸的序列: 1.酸水解得Val,Phe,Gly,Arg,Ile,Met,Thr。 2. Sanger试剂处理得 DNP-Gly。 3. 胰蛋白酶处理得Gly 、Arg、Thr和Ile、Met、Phe、Val;当以Sanger试剂处理时分别得到DNP-Gly 和DNP-Val。 4.溴化氰处理得Gly 、Arg、高丝氨酸内酯、Thr、Val和Ile、 Phe;当用Sanger试剂处理时,分别得DNP-Gly 和DNP-Ile。 自测题 答案:Gly-Thr-Arg-Val-M
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