猕猴桃果肉花青苷积累相关MYB转录因子的克隆及表达分析-园艺专业毕业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 独 独 创 性 声 明 本人声明，所呈交的学位论文，是在指导教师指导下，通过我的努力取得的成果，并且是 自己撰写的。尽我所知，除了文中作了标注和致谢中已经作了答谢的地方外，论文中不包含其 他人发表或撰写过的研究成果，也不包含在浙江农林大学或其他教育机构获得学位或证书而使 用过的材料。与我一同对本研究做出贡献的同志，都在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 如被查有严重侵犯他人知识产权的行为，由本人承担应有的责任。 学位论文作者亲笔签名： 日 期： 论文使用授权的说明 本人完全了解浙江农林大学有关保留、使用学位论文的规定，即学校有权送交论文的复印 件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其 他复制手段保存论文。 保密，在 年后解密可适用本授权书。□ 不保密, 本学位论文属于不保密。 □ （请在方框内打“√”） 学位论文作者亲笔签名： 日 期： 指导教师亲笔签名： 日 期： 摘要 摘要 万方数据 万方数据 摘要 红肉猕猴桃果心部位色彩艳丽，果肉口感香甜清爽，营养价值特别丰富，因此在 市场上深受消费者的喜爱。‘红阳’（Actinidia chinesis cv‘Hongyang’）是红肉猕猴桃里 最具代表性的品种，红色是‘红阳’猕猴桃吸引消费者的关键特性。为初步了解不同 肉色猕猴桃果实花青苷积累差异的机理，本研究以红肉品种‘红阳’、和绿肉品种‘华 特’（Actinidia eriantha Benth）为试验材料，分析了不同果实发育时期花青苷含量及 MYB 转录因子基因的表达变化，主要结果如下： 利用高效液相色谱法（HPLC）检测‘红阳’、‘华特’猕猴桃果实不同发育时期 果实花青苷的含量差异，随着果实发育进程，‘红阳’猕猴桃花青苷含量呈上升趋势， 而‘华特’猕猴桃花青苷含量一直保持相对较低水平；在果实相同发育时期，‘红阳’ 猕猴桃花青苷的含量显著高于‘华特’猕猴桃，在成熟期相差将近 44 倍。 利用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）结合快速扩增末端（RACE）技术分别克 隆了‘红阳’、‘华特’猕猴桃 MYB 转录因子的全长 cDNA，命名为 HYAcMYB 和 WtAeMYB，序列比较分析发现在 3’UTR 区 HYAcMYB 比 WtAeMYB 长 67 bp；利用 Real-time PCR 技术分析 HYAcMYB 和 WtAeMYB 在‘红阳’和‘华特’猕猴桃果实不 同发育时期表达调控，结果表明，HYAcMYB 的表达变化趋势与‘红阳’猕猴桃花青 苷含量变化趋势基本一致，AcMYB 在‘红阳’猕猴桃发育过程中表达显著高于‘华 特’猕猴桃，在花后 65 d，HYAcMYB 的表达量将近是 WtAeMYB 的 9 倍。因此，结 合果实花青苷积累规律以及 AcMYB 表达调控特性，推测 MYB 转录因子基因在猕猴 桃果肉花青苷调控途径中可能发挥了重要的作用，具体行使的功能还需本研究后续的 深入和结合结构基因的克隆表达结果来分析。 关键词：猕猴桃；MYB；花青苷；基因表达 I AB ABSTRACT ABSTRACT As the beautiful colour and unique flavor, sweet and refreshing taste, especially nutrient-rich, the red-fleshed kiwifruit becomes very popular. ‘Hongyang’ (Actinidia chinesis cv ‘Hongyang’ ) which is the most representative red-fleshed kiwifruit cultivar has a red color fruit core to attract people. In order to find out the mechanism on anthocyanins accumulation difference between red-fleshed kiwifruit ‘Hongyang’ and green-fleshed kiwifruit ‘White’（Actinidia eriantha Benth）, we analyzed the content of anthocyanins and the expression patterns of MYB transcription factor gene during fruit development. The main results are listed as follows: The anthocyanins content in ‘Hongyang’ and