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万方数据集 美 大 学 硕 士 学 位 论 文 毛 细 管 电 泳 — 电 化 学 发 光 联 用 检 测 水 产 品 中 的 生 物 胺 钱 勇 强
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毛细管电泳-电化学发光联用检测水产中的生物胺
摘 要
毛细管电泳(Capillary Electrophoresis, CE)是以毛细管为分离通道,高压直流电场为 驱动力,依据被分析物之间淌度来实现高效、快速分离的分析技术,CE 近年来采用高散 热效率、细内径的毛细管,以改善分离的质量。它具有分离效率高、样品用量少、分析速 度快等优点,被广泛应用于食品科学、生命科学、临床医学、分析化学领域。电化学发光
(Electrochemiluminescence, ECL)分析法是电化学手段与化学发光方法相结合的一门分析 技术,它具有灵敏度高、仪器设备简单、操作方便、控制性好和选择性强等优点,广泛地 应用于生物、环境、食品、医学、药学、临床、化学分析等领域。
生物胺广泛存在于肉类、水产品、酒类、奶类和果蔬等食品中,其中水产品由于含丰 富的氨基酸,因此体内含有多种生物胺,腐败和储藏不当均有可能大大提高生物胺的含量。 研究表明,低含量的生物胺是人和其他生物体内的生理活性物质,但食用含过量生物胺的 食品会对人体产生毒害作用。因此,建立一种高效快速检测水产品中生物胺的方法尤其重 要。CE-ECL 兼备了 CE 的高效、快速及 ECL 的灵敏、重现性好等优点,同时选用具有稳 定性高、发光效率高等优点的 Ru(bpy)32+作为电化学发光体系,用于分析检测 水产品 中的 生物胺。
基于 CE-ECL 简便、灵敏、高效等优点,本研究的目的在于建立分离检测水产品中的 生物胺的新方法。本文开展了如下几个方面的工作:
1. 建立以 Ru(bpy)32+为电化学发光体系的 CE-ECL 法,应用于检测鱼露中的苯乙胺。 实验表明:在优化条件下苯乙胺的 ECL 强度与浓度呈良好的线性关系,其线性方程为为 I =
1.73c + 9.71,相关系数 r = 0.9981,检出限(S/N = 3)为 0.06 μg/mL。采用 CE-ECL 法对 鱼露中的苯乙胺进行分析检测,峰高及迁移时间的相对标准偏差(RSD)值 0.43%和 0.29%, 加标回收率为 102.19~108.08%。
2. 首次应用 CE-ECL 对鲳鱼中色胺进行检测。在最佳优化条件下,二盐酸色胺标准样 品的浓度 1~8 mmol/L 范围内,二盐酸色胺的电化学发光强度与浓度呈良好的线性关系, 其线性方程为 I=20.649c+29.839,相关系数 r = 0.9996(n = 8)。检出限(S/N = 3)为 0.06mmol/L。
3. 建立一种以 Ru(bpy)32+为电化学发光体系的 CE-ECL 方法,应用于分离检测鱿鱼丝 中的组胺。结果表明:在检测电位 1.15V,Ru(bpy)32+浓度 5 mmol/L(pH=7.0),进样高压 10kV,进样时间 8s,运行高压 18kV;磷酸盐缓冲溶液 pH 值 3.40,浓度 50 mmol/L 条件 下,体系的电 化学发光 强度与二 盐酸组胺 的浓度呈良好 的线性关 系,其线 性方程为 Y=1.42x-30.83,相关系数 R=0.9981(n=6)。采用该方法对鱿鱼丝中的组胺进行测定,峰高 和迁移时间相对标准偏差(RSD)值为 0.43%和 0.29%,加标回收率为 100.32~106.55%。
4. 海蛎在厦门的产量大、消费高,但对于海蛎中生物胺含量的研究报道甚少。本实验
I
以海蛎为原料,采用 CE-ECL 联用技术,Ru(bpy)32+作为电化学发光体系,分离检测新鲜 海蛎中的腐胺、组胺、酪胺、苯乙胺和亚精胺,并且对海蛎在不同保藏过程中体内生物胺
含量的变化进行研究,探讨生物胺作为贝类食品新鲜度的可行性。实验结果表明,新鲜牡 蛎中亚精胺含量较高,而酪胺和组胺含量很低,各种生物胺随贮藏时间的延长均有不同程 度的增长。在 0 ℃条件下,4 天内各生物胺的含量变化不大,从第 4 天开始有不同程度的
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