链霉菌产生的除草霉素新组分发现及其他活性次级代谢产物研究-微生物与生化药学专业毕业论文.docxVIP

北京协和医学院博士学位论文 北京协和医学院博士学位论文 目录 第二部分 链霉菌产生的醌霉素鉴定及其他活性次级代谢产物的研究 79 1 一株醌霉素产生菌的鉴定及与其他菌株的初步比较 ．82 1．1 STREPTOMYCES SP．CPCC 200497产生醌善素的鉴定 ．82 1．11 实验材料 84 1．1．1．1 菌株 84 1．1．1．2 主要试剂及材料 ．84 1．1．13 培养基 ．85 1．1．1．4 主要仪器 ．87 1．1．2 实验方法 ． ． ．88 1．1．2．1 Streptomyces sp．CPCC 200497菌种保藏和发酵产物跟踪 ．．88 1．1．2．2 Streptomyces sp．CPCC 200497代谢产物抗菌活性的初测 88 1．1．2．3 Streptomyces sp．CPCC 200497次级代谢产物ESIMS、HRMS初步鉴定 ．．89 11．2．4 主要活性次级代谢产物的发酵和分离纯化 ．．89 1．1_2．5 主要活性次级代谢产物的结构鉴定 ．．90 1．1．2．6 醌霉素A和c的体外抗菌活性(MIC)测定 ．91 1．1．3 实验结果 ． ．．． ． 91 11．3．1 Streptomyces sp．CPCC 200497主要次级代谢产物具抗枯草芽孢杆菌活性 9l 1．1．3．2 Streptomyces sp．CPCC 200497主要活性次级代谢产物初步鉴定为醌霉素 。93 1．1．3．3 醌霉素A和C的1H．NMR、”C．NMR验证 99 1．1．3．4 醌霉素A和c对MRS和VRE耐药菌具有显著的活性 一101 1．1_3．5 Streptomyces sp，CPCC 200497产生其他类型次级代谢产物 104 1．1．4 总结与讨论 ． 107 1．2 几株醌霉素产生菌的初步验证和产量对比及其他次级代谢产物的研究 。109 1．2．1 实验材料 ．109 1．2．1．1 菌株 109 1．2．1．2 主要试剂及材料 109 I．2，1．3 培养基 109 1．2．1．4 主要仪器 110 l_22 实验方法 ．110 1．2．2．1 链霉菌的菌种保藏 110 1-22．2 链霉菌主产物的跟踪检测 110 1．2．23 链霉菌的丰产物的HPLC和ESI{+)MS鉴定 ．110 1．2．2．4 链霉菌CPCC 200240其他次级代谢产物的研究 】1 1 1．2．3 实验结果 ． ． 11 l 1．2．3．1 TLC初探几株链霉菌醌霉素产生情况 11 1 1．2．3．2 HPLC和ESI(+)MS联合验证三株醌霉素产生菌 ．．1 13 1．2．3．3 四株醌霉素产生菌产生能力的初步对比 1 16 1．2．3．4 链霉菌CPCC 200240产生其他次级代谢产物的探究 1 17 1．2．4 总结与讨论 ． ．． 120 万方数据 北京协和医学院博士学位论文 北京协和医学院博士学位论文 目录 2 链霉菌CPCC 204110次级代谢产物初步研究 ．122 2．1 实验材料 124 2．1．1 菌株 124 2．1．2 主要试剂及材料 124 2．1_3 培养基 124 2．1．4 主要仪器 124 2．2 实验方法 125 2．2．1 链霉菌954次级代谢产物的TLC、HPLC和LC．MS分析 一 125 2．3 实验结果 126 2．3．1 TLC、HPLC和LC．MS鉴定链霉菌954次级代谢产物可能含阿霉素 126 2．4 总结与讨论 133 参考文献。 ．134 全文总结 。140 -I’录 144 致谢 ● ● 个人简历 ．．． ．168 万方数据 北京协和医学院博士学位论文 北京协和医学院博士学位论文 中文摘要 链霉菌产生的除草霉素新组分发现及其他活性次级代 谢产物研究 中文摘要 链霉菌具有产生丰富次级代谢产物的能力，能够产生多种化学结构和多样生理 活性的次级代谢产物，是微生物药物重要来源。早期的微生物次级代谢产物主要是 采用生物活性跟踪的方法进行发现，而化学筛选方法在系统挖掘链霉菌次级代谢产 物的研究中扮演了越来越重要的角色。 本论文共分为两部分，第一部分是通过生物合成分析指导，利用微生物天然产 物的化学筛选方法从吸水链霉菌Streptomyces sp．CPCC 200291的次级代谢产物中挖 掘到两个新的除草霉素类似物：第二部分是链霉菌产生的醌霉素组分的鉴定以及其 他链霉菌产生次级代谢产物线索。 除草霉素A(herbimycinA，HBMA)是由吸水链霉菌产生的苯醌型安莎类抗生 素，与格尔德霉素结构类似，也是热休克蛋I兰tHsp90特异性抑制剂，具有显著地抗 肿瘤活性，是抗肿瘤药物的先导化合物。研究除草霉素的类似物，也有可能