六个先天性眼球震颤家系的分子遗传学研究-临床医学；眼科学专业毕业论文.docxVIP

天津医科大学博士学位论文中文摘要 天津医科大学博士学位论文 中文摘要 目的 对6个先天性眼球震颤家系，包括4个X连锁先天性特发性眼球震颤 (X—linked congenital idiopathic nystagmus，XL-CIN)和2个伴有无虹膜的 先天性感觉缺陷性眼球震颤(sensory defect nystagmus，SDN)家系进行分子 遗传学研究，探讨其致病的分子基础。 方法 1、X连锁先天性特发性眼球震颤：收集4个XL-CIN家系的临床资料及采集 家系成员外周静脉血各5 m1，提取基因组DNA；以先证者基因组DNA为模板， PCR扩增XL—CIN候选致病基因FRMD7的全部外显子及其外显子一内含子拼接部的 序列，DNA直接测序筛查突变位点；一旦发现致病性突变位点，则采用DNA直接 测序方法在其家系成员进行疾病与致病突变共分离分析，进一步确认致病性突 变位点。 2、先天性感觉缺陷性眼球震颤：对2个伴有无虹膜的SDN家系成员进行全 面fjcJIll曼部检查，采集这2个家系共6例患者和5名健康成员外周静脉血各5 ml， 提取基因组DNA；以先证者基因组DNA为模板，PCR扩增候选致病基因PAX6的 14个外显子及其外显子一内含子拼接部的序列，DNA直接测序筛查突变位点； 一旦发现可疑致病性突变位点，则采用DNA测序方法在其家系成员进行疾病与 致病突变共分离分析及单核苷酸多态性(SNP)排除分析，进一步确认致病性突变 位点。 结果 l、 4个先天性特发性眼球震颤家系的遗传模式符合X一连锁显性遗传伴外 显不全，FRMD7基因突变筛查发现其中2个家系携带已知致病性突变位点，即 XL—CIN02家系患者在FRMD7基因外显子8存在C．G886C错义突变(GGTCGT)，导 致FRMD7蛋白第296位的甘氨酸被精氨酸代替(P．G296R)；XL-CIN03家系患者在 FRMD7基因外显子10存在C．C910T无义突变(CGATGA)，导致该基因编码蛋白在 304位的精氨酸提前终止(P．R304X)，产生一个截短形式的变异多肽。 2、2个先天性感觉缺陷性眼球震颤家系皆伴有先天性无虹膜，呈常染色体 显性遗传。SDN一01家系患者还合并双眼黄斑中心凹发育不良和早发性白内障 (presenile cataract)，PAX6基因突变筛查发现患者在该基因第5外显子存在一个 天津医科大学博士学位论文杂合性复制突变(C．95—105dupll)，该突变为一个de 天津医科大学博士学位论文 杂合性复制突变(C．95—105dupll)，该突变为一个de novo新突变，导致该基 因编码蛋白在第36位甘氨酸提前终止(p．G36X)，产生一个截短的多肽；SDN-02 家系表现单纯性无虹膜，突变筛查发现患者在PAX6基因第8外显子存在一个 C．C607T杂合性无义突变，导致编码蛋白在第203位精氨酸提前终止(p．R203X)， 产生一个截短的多肽。 结论 1、FRMD7 G296R矛NR304X突变分别是导致XL—CIN02$HXL—CIN03家系患者致病 的分子基础。 2、在一个伴有双眼先天性无虹膜、黄斑中心凹发育不良和早发性白内障的 先天性感觉缺陷性眼球震颤家系(SDN一01)中发现了一个de novo PAX6基因 c．95—105dupl l(P．G36X)新突变；在一个伴有单纯双眼先天性无虹膜的先天性感 觉缺陷性眼球震颤家系(SDN-02)中发现了一个PAX6基因C．C607T(P．R203X) 热点突变。 关键词：先天性跟球震颤无虹膜PAX6基因FRMD7基因 突变 天津医科大学博士学位论文Abstract 天津医科大学博士学位论文 Abstract Objective To identify the molecular defect of six Chinese congenital nystagmus families， including four X—linked congenital idiopathic nystagmus(XL_CIN)families and two sensory defect nystagmus(SDN)families with aniridia． Methods 1．XL．CIN：The members of the four pedigrees were recruited，clinical examinations were performed，and genomic DNA was extracted from peripheral blood leukocytes．The coding exons and splice junctions of the human FRMD7