激素法与液氮冷冻法建立犬股骨头坏死造模中的应用比较研究.doc

福建医科大学 2011 级硕士研究生毕业论文 糖皮质激素具有抗炎及免疫抑制作用, 临床上广泛应可用于各种急慢性疾 病的治疗如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、脊髓损伤 、狼疮肾炎、肾移植术 后等。但是大剂量或长期使用糖皮质激素会导致一系列严重的并发症,如股骨头 坏死、库欣综合征、诱发或加重感染及引起消化道溃疡等[12]。激素已成为股骨头 坏死发展的一个重大风险因素之一，并且发病率呈逐年增高趋势。近些年，随着 激素在临床上广泛的使用，SANFH 已成为非创伤性股骨头坏死的首位，约占 30%-50%[13]。Pietrogrami 等[14],于 1957 年首次报道大剂量激素冲击疗法或长时 间服用激素均可导致股骨头坏死。目前激素引起股骨头坏死的发病机制和引起骨 股头坏死的病理机制仍未不明确，近年来，国内外学者对其方法不同，因此看法 各异，尚未统一结论。所以探索糖皮质激素诱导股骨头坏死的机制从而及时有效 地干预股骨头坏死的发生发展势在必行。 酗酒是股骨头坏死病因的另一个重要的危险因素。由于物质文化生活水平的 提升，各种酒的消费量也日益增加，酒精中毒(alcoholism)已经成为引起非创伤 性股骨头缺血性坏死的重要病因之一。其机制[15, 16]:(1) 过量饮酒导致高脂血症 和脂肪肝;(2)脂肪栓塞学说;(3) 长期过量饮酒导致脂质代谢紊乱;(4) 内源性 糖皮质激素水平升高;(5)饮酒过度导致骨细胞脂肪变性(酒精对细胞的毒性);(6) 酗酒导致骨质疏松。 Yung等[17]，采用酒精灌胃SD鼠，观察1-6个月。他们指出 ，随着时间的推移， 脂肪细胞的肥大和增殖，空骨陷窝也随之增加。manggold等[18]，用酒精注射到股 骨头羊的中心，创建一个区域死骨。该模式会产生一个可重复的坏死病灶，该模 型的建立可供评价治疗策略作用。Zhu等[19]报道采用乙醇局部注射诱发羊ONFH模 型，12周后发现股骨头外形塌陷，25周后观察到关节间隙变窄。局部注射乙醇后 股骨头局部具有明显生物学效应，而饮酒后乙醇经胃肠道吸收可产生全身效应， 进而又特异性地作用于股骨头，导致ONFH发生，两种生物学效应所产生的病理生 理学变化存有差异。局部注射乙醇诱发的ONFH与人类乙醇性ONFH病理生理过程是 否相似，仍有待进一步研究。 但是，在实验研究中缺少对酒精浓度、酒精摄人量和循环、酒精中毒情况和 个体差异性的衡量标准[20]，虽能与临床上酒精性股骨头缺血性坏死特征相似,但 可重复性低,难以标准化 ,均不能完全反映酒精性股骨头缺血性坏死复杂的发病 机制和病理学特征。所以酒精引起股骨头坏死模型不符合本课题要求，予以排除。 9 万方数据 福建医科大学 2011 级硕士研究生毕业论文 1981年 Takaoka等[21] 首次建立了液氮冷冻诱导股骨头坏死的动物模型。 液氮冷冻 ONFH 动物模型，其具有实验过程简单及可行、全身反应小、动物死亡 率低而成为较常用的股骨头坏死造模方法之一[22]。液氮冷冻诱导股骨头坏死动物 模型可用于各种治疗性实验研究，而且其造成的股骨头坏死与化学方法不同，它 具有化学物质不残留的优点，近年来此种造模方法逐渐为研究所重视。因此建立 一种创伤小、病理演变特征贴近人类股骨头坏死且全身反应小的液氮冷冻犬 ONFH模型，可为后期钽金属治疗股骨头坏死的研究奠定了良好的模型基础。 鉴于此，本课题选用造模方式简单，经济及可行性好的液氮冷冻法与激素甲 基强的松龙联合内毒素脂多糖法建立犬股骨头坏死模型，并观察两种造模法后动 物生存状态、病理改变及影像学的变化，分析比较激素甲基强的松龙联合内毒素 脂多糖法法与液氮法在股骨头坏死动物模型的应用，寻求建立一个良好的稳定的 股骨头坏死动物模型，以推动临床上 ONFH 预防、早期诊断、延缓病程演变、药 物及手术治疗。 10 万方数据 福建医科大学 2011 级硕士研究生毕业论文 材料与方法 一材料 实验动物：健康成年雄性 Bea gle 犬 15 犬，南京军区福州总院比较医 学科实验动物中心提供。 主要试剂及仪器 试剂仪器名称 试剂仪器来源 甲基强的松龙 美国法码西亚药厂比利时生产厂 脂多糖 0111：B4， 西格玛公司，美国 注射青霉素钠 国药集团国瑞药业有限公司 阿托品注射液 国药集团国瑞药业有限公司 戊巴比妥注射液 国药集团国瑞药业有限公司 庆大霉素 国药集团国瑞药业有限公司 奥美拉唑注射液 上海新先锋药业有限公司 苏木素 湖北慧达仪器有限公司 中性树胶 湖北慧达仪器有限公司 五水合硫代硫酸钠 湖北慧达仪器有限公司 二甲苯 湖北慧达仪器有限公司 直接数字化 X 射线摄影系统（DR） 德国 SIEMENS公司 计算机断层扫描（CT） 德国 SIEMENS公司 -T 磁共振（MRI） 德国 SIEMENS公