野菊花总黄酮及蒙花苷含量测定方法研究.docVIP

野菊花总黄酮及蒙花昔含量测定方法研究 吕定刚(广西桂林市兴安县人民医院541300) 【摘要】目的 研究野菊花总黄酮和蒙花昔含量的测定方法。方法 选取不 同产地的野菊花药材作为研究对象，分别利用紫外分光光度法和HPLC法测定总 黄酮和蒙花昔含量。结果经测定，不同来源的野菊花在具体的总黄酮和蒙花昔 含量上差异较显著，其中，蒙花昔和总黄酮含量均相对较高的野菊花大多来自安 徽和湖北地区。结论在测定野菊花中总黄酮和蒙花昔的具体含量的时候，可以 釆用HPLC法和紫外分光光度法，且最终的测定结果较为准确可靠，可为临床评 估药草质量提供有力的依据。 【关键词】野菊花总黄酮蒙花昔含量测定方法 【中图分类号】R927.1 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2013) 35-0013-02 木研究中，笔者选取不同产地的野菊花药材作为硏究对象，分別利用紫外分 光光度法和HPLC法测定总黄酮和蒙花昔含量。现将研究结果进行如下报告。 1材料与用品 1.1材料 选取不同产地(安徽、湖北、河北等地)的野菊花干燥花蕾若干作为研究对 象，并由西南大学植物学教研室王海洋教授鉴定，确定为野菊(Chrysanthemum indicum L.)的干燥花蕾。 1.2仪器 (1)高效液相色谱仪:型号LC — 20AB (SPD-20紫外检测器，日本岛津);(2) 紫外分光光度计：型号U-3010(H木日立)；(3)电子天平：型号EL-2046 (梅特勒 一托利多仪器有限公司)；(4)电热恒温水浴锅：型号HHSYZI?NI(北京市风仪器 仪表公司)。 1.3试药 蒙花昔对照品（中国药品生物制品检定所，批号111528-200303）,水为自制 重蒸水，乙腊和甲醇为色谱纯，其余试剂为分析纯。 2方法 2.1蒙花昔含量测定[1,2,3] 2丄1溶液制备 （1）供试样品溶液制备：取野菊花药材粉末0.25g左右，置于锥形瓶中， 添加100mL甲醇，加塞，称定重量后加热冋流3h。自然冷却室温，添加甲醇补 足减失重量。摇匀后劲滤过，得续滤液备用。（2）对照品溶液制备：于量瓶中放 置5mg蒙花昔对照品，添加甲醇后进行超声溶解。 2.1.2色谱条件 用高效液相色谱仪测定对照品和供试品的色谱图，具体结果如下图所示。 图1 色谱图 1蒙花甘A对照品B供试品 2.1.3线性试验 精密吸取浓度为24.20 mu;g/mL的蒙花昔对照品溶液2, 5, 10, 20, 30mu;L,利用高效液相色谱仪进行测定。得岀回归方程，经计算可得，如果进 样量在0.04840?0.726 0 mu;g之间的时候，蒙花昔会呈线性变化。 2.1.4稳定性 利用2.1.1中的方法进行溶液制备，然后室温下静置，分别于0, 2, 4, 6, 8, 12 h进行测定。计算二者的色谱峰峰面积RSD,经计算可得对照品蒙花昔为 0.54%,供试品为0.87%o 2.1.5重复性 另取同样的样品，按照浓度的高、中、低进行划分，并采用同样的方法每浓 度制备3份供试品溶液，测定蒙花昔含量。计算3个浓度的RSD平均值，经计 算为1.89% o 2.1.6冋收率实验 设高、中、低3个浓度，分别制备3份供试品溶液，在不同浓度进行测定。 计算不同浓度的平均冋收率数值，经计算可得为97.1%, RSD为2.19%。 2.1.7测定样品 取适量药材，制备供试品溶液后测定蒙花背含量，n=3o最终结果如表1所 zj\ O 不同产地野菊花中蒙花昔含量(23) 编号采集吋间来源原植物蒙花井含量(%) RSD(%) 110.10.27安徽采集野菊花1.43 0.762 10.11.06湖北采集野菊花1.81 0.433 10.11.03湖北采集野菊花1.67 0.984 10.11.06安徽采集野菊花3.37 1.105 10.10.28湖北采集野菊花2.25 0.596 10.11.03江苏采集野菊花0.25 0.377 10.11.01河南采集野菊花0.49 1.24 110.10.27 安徽采集野菊花 1.43 0.76 2 10.11.06 湖北采集野菊花 1.81 0.43 3 10.11.03 湖北采集野菊花 1.67 0.98 4 10.11.06 安徽采集野菊花 3.37 1.10 5 10.10.28 湖北采集野菊花 2.25 0.59 6 10.11.03 江苏采集野菊花 0.25 0.37 7 10.11.01 河南采集野菊花 0.49 1.24 8 10.10.29 购买甘菊0.45 0.86 9 10.11.04 购买甘菊0.310.51 10 10.11.10河北采集甘菊0 0 2.2总黄酮含量测定[4,5,6] 221溶液制备 (1)对照品溶液：于量瓶中放置5 mg蒙花昔对照品，添加适量乙醇后进行 超声溶解