斑马鱼Jak2a基因的克隆、表达及其对造血功能影响的初步研究.doc

华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 第一部分 斑马鱼疾病模型及基本实验技术 斑马鱼运用在造血研究领域已有 50 余载, 对斑马鱼胚胎的研究最早要追溯 至19 世纪30 年代, 前期关于斑马鱼的研究多限于动物实验学及药物毒理学方面 [1]。1970 年首次对斑马鱼的血细胞形态进行了详细的阐述[2, 3]。由于近代遗传 学实验方法的运用, 斑马鱼造血系统的研究进入了“近现代” 阶段, 近十年来主 要针对斑马鱼造血系统缺陷突变体的研究, 特别是对斑马鱼贫血疾病的认识[4- 6]。 造血系统遗传学实验学方法的应用最先起源于小鼠。起初, 实验研究模型主 要来源于自发突变体的小鼠[7] 。 而对于特定基因的功能学研究, 仍需依靠体内 转基因和基因打靶技术, 近 25 年，这些方法占据了小鼠实验的主导地位。然 而，反向遗传学功能性分析研究的基因具有定向性偏倚, 并且反向遗传学的基 因-基因研究方法并不能阐述所有的造血系功能基因。因此, 传统的人类血液学 疾病的遗传学基础仍不明确。 果蝇的造血系统与脊椎动物如哺乳动物是不同的[8]。在基因水平, 果蝇造血 系转录因子家族和信号通路是具有代表性的[8], 然而在细胞水平, 相对哺乳动 物, 果蝇的造血系发育较原始, 且固有免疫缺失。 运用正向遗传学筛选法寻找造血系突变体已有报道, 包括预期的(Ikaros13, c- Myb14, Gat