HPLC法对于小儿清热止咳口服液中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱含量的检测结果分析.docVIP

HPLC法对于小儿清热止咳口服液中盐酸麻 黄碱和盐酸伪麻黄碱含量的检测结果分析 【摘要】目的建立用高效液相色谱法测定小儿清热止咳 口服液中盐酸麻黄碱及盐酸伪麻黄碱的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法，色谱柱ZORBAX SB C18，流动相： 0.1 mol/L磷酸-乙腈(96： 4, pH调节至6.0)，流速1 ml/min，控制柱温为30°C,检测波长为205nm,定量方法 为峰面积外标法。结果盐酸麻黄碱线性范围为4.263? 42. 63 ug/ml (r=0. 9998),平均回收率为 99. 49%，RSD 为 2.21% (n=10)， 盐酸伪麻黄碱线性范围为5. 135? 51.35ug/ml(r=0. 9997),平均回收率 96. 97%, RSD 为 4. 64% (n=10)。结论高效液相色谱法测定小儿清热止咳口服液中 盐酸麻黄碱及盐酸伪麻黄碱浓度简单快捷、定量结果准确、 灵敏度高、重复性好，可作为该制剂的质量控制方法推广。 【关键词】盐酸麻黄碱；盐酸伪麻黄碱；小儿清热止 咳口服液；高效液相色谱法 小儿清热止咳口服液是由麻黄、苦杏仁、黄苓、甘草等 7味药材组成［1］，具有清热宣肺，平喘，利咽等功效。 目前，主要的测量方法有分光光度计法、固相萃取和高效 液相色谱法，本文拟采取高效液相色谱法测定小儿清热止 咳口服液中盐酸麻黄碱及盐酸伪麻黄碱的含量，探讨此法 的可行性及可靠程度。 1仪器与试剂 1仪器日本岛津高效液相色谱仪LC-2010AHT。 2试药与试剂盐酸麻黄碱对照品（中国药品生物制 品检定所，批号：741-5231）。盐酸伪麻黄碱对照品（中 国药品生物制品检定所，批号：535-4636）小儿清热止咳 口服液（10 mlX6支/盒，国药准字生产企 业：江西杏林白马药业有限公司）磷酸为分析纯，甲醇及 乙腈均为色谱纯。 2方法与结果 1色谱分析条件：采用高效液相色谱紫外检测法，色 谱柱 ZORBAX SB C18 分析柱（250mm X 4. 6mm, 5um）,流动 相：0.5%磷酸溶液，乙腈（96: 4），pH6. 0），流速 1 ml/min， 控制柱温为30°C，色谱可达到很好的分离，对品峰进行紫 外光谱扫描，并参照中国药典中伪麻黄碱测定条件，检 测波长为205nm，定量方法为峰面积外标法。色谱柱的理论 板数大于5000，分离度大于1. 5. 2提取条件及对照组、供试品溶剂的制备[2]:研究 中，本研究组实验了甲醇-盐酸和碱液蒸馏2种方法，结 果发现碱液蒸馏法的色谱中杂质峰干扰较大，无法准确定 量，因此，提取方法采用碱液蒸馏法。取对照品适量后精 密称量，加0. 1 mol/L盐酸制成20 ug/ml的溶液。采用 20Na0H对供试品进行蒸馏提取。 2. 3线性关系考察：称取麻黄碱和伪麻黄碱对照品溶 液(麻黄碱浓度42. 63 P g/ml,伪麻黄碱浓度51. 35 P g/ml), 分别稀释至1倍、2倍、3倍、4倍及5倍浓度，进样量20 Pl注入色谱仪，记录麻黄碱及伪麻黄碱峰面积，以浓度 (u g/ml)为横坐标，以相应的麻黄碱及伪麻黄碱峰面积 为纵坐标进行回归，得到线性方程：盐酸麻黄碱： Y=43. 222X-23. 42， r=0. 998， 盐酸伪麻黄碱： Y=46. 52X-36. 74， r=0. 997， 表明盐酸麻黄碱线性范 4.263?42.63 u g/ml,盐酸伪麻黄碱线性范围为5. 135 51. 35 P g/mlo 2. 4精密度试验[3]:取同一批样品按相同方法制备所 需溶液，平行测定6次的含量结果：说得峰面积的RSD麻 黄碱为0. 9%，盐酸伪麻黄碱为1. 1%。证明高效液相色谱法 测定小儿清热止咳口服液中麻黄碱及伪麻黄碱浓度的方法 得到的测定结果精密度较高。 2. 5回收率试验：方法同线性关系试验，以峰面积计 算麻黄碱和伪麻黄碱含量，根据含量结果计算回收率，结 果盐酸麻黄碱平均回收率为99.49%，RSD为2. 21%(n=10)， 盐酸伪麻黄碱的平均回收率96. 97%，RSD为4.64% (n=10)o 证明高效液相色谱法测定小儿清热止咳口服液中麻黄碱及 伪麻黄碱浓度的方法得到的测定结果准确可靠。如表1，表 2所示。 3讨论 研究的结果显示：采用高效液相色谱法，色谱柱ZORBAX SB C18,流动相：0. lmol/L磷酸-乙腈，盐酸麻黄碱线性 范围为4. 263?42. 63 ug/ml (r=0. 9998), 平均回收率为 99. 49%, RSD为2. 21% (n=10)，盐酸伪麻黄碱线性范围为 5. 135 ?51.35 yg/ml(r=0. 9997)，平均回收率 96.97%, RSD 为4. 64% (n=10)。通过利