三氧化二砷对人脑胶质瘤SHG44细胞增殖抑制及放射增敏作用的研究-放射医学专业论文.docxVIP

三氧化二砷对人脑胶质痛SHG44细胞增殖抑制及放射增敏作用的研究 三氧化二砷对人脑胶质痛SHG44细胞增殖抑制及放射增敏作用的研究 中文摘要 中文摘要 目的：探讨三氧化二砷(As203)对人脑胶质瘤SHG44细胞增殖的抑制作用： 研究As203对SHG44细胞的放射增敏作用及其机制。 方法：利用MTT法观察As203对SHG44细胞的增殖抑制率；3H．TdR掺入法研 究As203和照射对细胞DNA合成率的影响；激光共聚焦显微镜观察AO／El l染色后 的细胞凋亡变化；流式细胞法检测As203作用后膜联蛋白含量和观察As203对细胞周 期分布的影响；DCFH．DA标记后检测细胞内活性氧自由基(ROS)水平：用单细胞 凝胶电泳技术评价DNA的损伤程度。 结果：Asz03对SHG44细胞增殖具有明显抑制作用，随作用浓度的升高和作用 时间的延长，细胞的增值抑制率升高，抑制作用呈现剂量依赖性和时间依赖性；As203 和照射联合作用于SHG44细胞，表现为剂量生存曲线左移，SF2下降，D。减低，Dq 变小，细胞的放射敏感性明显增强：AO／EB染色后观察细胞及膜联蛋白检测证实 As203诱导SHG44细胞凋亡；As203影响细胞周期再分布，对射线敏感的G：_M期细胞 比例增加，对射线抗拒的s期细胞比例减少：As203可以明显提高SHG44细胞内ROS 水平，其ROS水平随As203作用浓度的增高明显增高，具有浓度依赖关系：As203 作用浓度的增加，细胞内ROS水平升高，细胞DNA损伤程度加大：照射与As203 联合作用对细胞DNA的损伤程度高于照射、As203分别单独作用。 结论：Asz03能明显抑制SHG44细胞的增殖，增加SHG44细胞的放射敏感性， 其机理可能与诱导细胞凋亡、影响细胞周期再分布和升高细胞内活性氧水平有关。 关键词：人脑胶质瘤SHG44细胞；三氧化二砷；放射增敏；凋亡：细胞周期； 活性氧。 作 者：黄辉 指导教师：刘芬菊 曼氧化=砷对人脑胶质瘸SHG44细胞增殖抑制及放射增敏作用的研究 曼氧化=砷对人脑胶质瘸SHG44细胞增殖抑制及放射增敏作用的研究 英文摘要 Abstract Objective To investigate the anti—proliferation of arsenic trioxide on Suzhou human glioma cells-44(SHG44)；To evaluate the enhancement of radiosensitivity by arsenic trioxide on SHG44 cells in vitro and its mechanism． Methods SHG44 cells were cultured in different concentrations of arsenic trioxicle medium in vitro．The inhibitory ratio of the cells were measured by MTT assay．To study the enhancement of radiosensitivity by arsenic trioxide on SHG44 cells,啊．TdR incorporation assay has been applied．Assays for apoptosis of the SHG44 cells were performed using AO／EB staining and Annexin V technique．Cell cycle distribution was analyzed by flowcytometry．Intracellular reactive oxygen species(ROS)was detected by using 2’，7’dichlorofluorescein diaeetate(DCFH-DA)．DNA damage was evaluated by comet assay． Results Arsenic trioxide could cause apoptosis and inhibit the growth of SHG44 cells significantly．The suppression was both in dose-dependence and time—dependence． Arsenic trioxide definitely enhanced radiosensitivity of SHG44